引用本文： 王莉, 任丽玲, 高宇, 李文, 李硕, 左川, 武永康. 抗Ro52抗体和抗Ro60抗体的临床应用价值探讨. 华西医学, 2014, 29(5): 879-882. doi: 10.7507/1002-0179.20140267 复制
抗SSa抗体（即抗Ro抗体）作为抗可提取核抗原（ENA）抗体谱中的抗体之一，对于自身免疫性疾病的诊断具有重要的临床价值[1]。在临床实践中，通常采用将SSa作为固相抗原蛋白质印迹法进行抗SSa抗体检测。SSa抗原是小分子细胞质核糖核蛋白，是蛋白和小分子核糖核酸形成的复合物，其由相对分子质量分别为60×103和52×103的两种蛋白组成，即抗SSa抗体包括抗Ro52和抗Ro60两种自身抗体。但由于国内很多试剂生产商采用胸腺组织作为蛋白质印迹法检测抗SSa抗体固相抗原，而胸腺中缺少相对分子质量为60×103的抗原成分[2]，因此这种试剂只能检测抗Ro52抗体，过去国内外很多文献报道的抗SSa抗体主要指抗Ro52抗体。随着分子生物学技术的发展，重组纯化的Ro52和Ro60抗原检测两种不同抗体已逐渐应用于临床，但两种抗体的临床意义尚不甚明确。因此我们回顾性分析了2009年1月－2013年12月23 145例抗Ro52和抗Ro60抗体与其他自身抗体及患者临床信息的关系，以探讨其对临床疾病的诊断价值。现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
纳入2009年1月－2013年12月在四川大学华西医院及中国人民解放军第452医院同时检测抗核抗体（ANA）和ENA抗体，且ANA检测结果为阳性的患者23 145例，其中男3 857例，女19 288例，男女比例为1︰5.00。其中男2～92岁，平均51.3岁；女1～93岁，平均40.7岁。根据患者临床信息，分为自身免疫病确诊组2 340例，非自身免疫疾病确诊组1 601例，具有明确症状非确诊组2 059例，其余17 145例患者未查及临床信息。
1.2 研究方法
① 分析抗Sm、抗SSb、抗RNP、抗Scl-70、抗Jo-1、抗Rib-P 6种抗体出现阳性时抗Ro52和抗Ro60抗体阳性情况。
② 依据抗Ro52与抗Ro60抗体结果表现不同，将其分为4组，即抗Ro52抗体和抗Ro60抗体均为阳性（Ro52+Ro60+）、抗Ro52抗体阳性而抗Ro60抗体阴性（Ro52+Ro60-）、抗Ro52抗体阴性而抗Ro60抗体阳性（Ro52-Ro60+）以及抗Ro52抗体和抗Ro60抗体均为阴性（Ro52-Ro60-），以分析抗Ro52和抗Ro60抗体在自身免疫性疾病、非自身免疫性疾病及临床症状的分布情况，进一步推测单独抗体的致病作用。由于Ro52+Ro60+和Ro52-Ro60-时无法判断两者单个抗体的诊断价值及致病作用，因此在不同疾病与抗Ro52和抗Ro60关系分析中，本研究主要分析了Ro52-Ro60+及Ro52-Ro60+两种结果组合的比较关系。
1.3 检测方法
ENA抗体检测采用重组纯化抗原的蛋白质印迹法，可同时检测抗Sm、抗Ro52、抗Ro60、抗SSb、抗RNP、抗Scl-70、抗Jo-1、抗Rib-P 8种抗体，试剂盒购自德国欧蒙生物技术有限公司，试剂盒在效期内使用。
1.4 结果判断标准
将血清在反应槽中1︰100倍稀释，按试剂说明书操作。试剂条显色区带与标准带进行对照，显色判断相应的抗体为阳性，不显色则为阴性。
1.5 统计学方法
采用SPSS 19.0软件进行统计分析，分类资料的比较采用χ2检验，检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 抗Ro52和抗Ro60抗体与其余6种ENA抗体谱的关系
在23 145例患者中，ENA 8种自身抗体阳性率各不相同，抗Ro60抗体阳性率为35.19%（8 145/23 145），抗Ro52抗体阳性率为13.16%（3 046/23 145）。且抗Ro60抗体在抗SSb、抗RNP、抗Sm及抗Rib-P阳性患者中的阳性率较抗Ro52高（P＜0.05）；抗Jo-1及抗Scl-70阳性时，抗Ro52和抗Ro60的阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）。见表 1。
表1
抗Ro52和抗Ro60抗体与其余6种ENA抗体谱的关系[例（%）]
2.2 自身免疫性疾病与抗Ro52和抗Ro60关系
Ro52-Ro60+结果在自身免疫性疾病中所占比例较Ro52+Ro60-结果显著升高（P＜0.05）。具体疾病分布见表 2。
表2
不同自身免疫性疾病抗Ro52和抗Ro60组合的分布情况[例（%）]
2.3 非自身免疫性疾病与抗Ro52和抗Ro60关系
在1 601例确诊的非自身免疫性疾病患者中，由于疾病种类较多，为了分析抗Ro52与抗Ro60对靶器官的影响，本研究将累及器官分为肾脏、肝脏、肺部、心血管及恶性肿瘤等5类，其他累及器官的疾病如带状疱症、腹泻、脑梗死、尿路感染、急性胰腺炎等由于病例较少且很分散而未纳入分析。Ro52-Ro60+结果在肾脏、肝脏、肺部、心血管及恶性肿瘤各组中所占比例较Ro52+Ro60-结果较高（P＜0.05），详细结果见表 3。
表3
抗Ro52和抗Ro60不同结果组合在不同非自身免疫性疾病中的分布情况[例（%）]
2.4 临床症状与抗Ro52和抗Ro60关系
在2 059例表现不同的临床症状患者中，将疑诊为自身免疫性疾病的患者以临床症状进行分析；蛋白尿、黄疸、浮肿、腹痛、头痛、呕吐、红斑、肝功异常、血尿等临床症状由于病例较少未纳入分析。Ro52-Ro60+结果在各种症状的患者中所占比例较Ro52+Ro60-结果较高（P＜0.05），详细结果见表 4。
表4
抗Ro52和Ro60不同结果组合在不同临床症状在的分布情况[例（%）]
3 讨论
抗SSa抗体与干燥综合征（SS）有关，由于该自身抗体为SS相关的第一个抗体而得名，但其特异性不佳[3]，是目前已知的ENA抗体中分布最广、最常见的一种抗体[4]。抗SSa抗体包括抗Ro52和抗Ro60，两者阳性率均较高，本研究显示两者分别占ANA阳性病例的13.16%（3 046/23 145）和35.19%（8 145/23 145）。在临床实践中，作为SS诊断标准之一[5]，抗SSa抗体常结合抗SSb抗体一起诊断SS，以提高诊断特异性。抗SSb抗体常伴随抗SSa抗体一起出现，这是由于SSb抗原决定簇是SSa抗原的一部分[1]，但由于SSa抗原包括Ro52和Ro60两种抗原，SSb抗原与哪种抗原关系更密切还不明确。本研究将抗Ro52和抗Ro60抗体与ENA其余6种抗体相关关系进行了分析，表 1结果显示，抗Ro60抗体与抗SSb、抗RNP、抗Sm及抗Rib-P的阳性一致率较抗Ro52高，而抗SSb抗体与SS密切相关[6]，抗RNP为混合性结缔组织病（MCTD）的诊断标准之一[7]，抗Sm及抗Rib-P是诊断系统性红斑狼疮（SLE）的标志性抗体[8, 9]，提示抗Ro60抗体相对抗Ro52抗体而言，其对SS、MCTD及SLE可能具有较高的诊断预示性；但Retamozo等[10]认为抗Ro52抗体与SS的诊断价值更加特异，这与本研究结果不尽相同，需要进一步研究证实。
Tan等[4]报道，抗SSa抗体可出现在多种自身免疫性疾病如SLE、SS、类风湿关节炎（RA）、特发性血小板减少性紫癜（ITP）等患者血清中，且均有较高滴度。但由于当时技术原因，Tan[4]未说明其检测的抗SSa抗体具体是哪种抗体，因此，临床医生在应用两种抗SSa抗体时感到困惑，需进一步分析抗Ro52抗体及抗Ro60抗体的诊断价值。本研究表 2结果显示，在各种自身免疫性疾病中Ro52-Ro60+所占的比例较Ro52+Ro60-高，提示Ro52-Ro60+对自身免疫性疾病的诊断价值较Ro52+Ro60-高，而这些自身免疫性疾病中以SLE、RA及SS较多。这与表 1的分析结果基本一致，即Ro52-Ro60+与SLE的标志性抗体抗Sm及抗Rib-P阳性一致率较高，与SS的标志性抗体抗SSb也有较高的阳性一致率。但有研究认为认为抗Ro52对SS更加特异[11, 12]，今后应随机纳入SS患者以进一步分析。
抗Ro52与抗Ro60抗体除了在自身免疫疾病患者会出现阳性，其在非自身免疫性疾病患者也会出现阳性。本研究表 3结果显示，Ro52与Ro60均会出现累及各系统的非自身免疫性疾病，但Ro52-Ro60+在多种非自身免疫性疾病患者中的分布均高于Ro52+Ro60-，表明抗Ro60较抗Ro52抗体的阳性率较高但无疾病诊断特异性，对非自身免疫性疾病的诊断和鉴别诊断价值有限。但这些非自身免疫性疾病的患者可能就是因自身免疫造成器官损伤，只是尚未确诊而已。如SLE最易累及肾脏[13]，在本研究中，肾脏疾病患者较多，可能部分就是由于自身免疫性疾病累及肾脏所引起。在未确诊的症状患者组，疑似自身免疫性疾病患者Ro52-Ro60+比例较Ro52+Ro60-高，因此，我们推测Ro52-Ro60+具有发展为自身免疫性疾病的可能性。虽Ro52+Ro60-阳性率较低，但对于疾病诊断价值而言其无疾病特异性。可能由于抗Ro60和抗Ro52抗体结合靶向抗原的特异性较差，因此表现症状及疾病分布广泛，造成疾病及症状广泛性分布。有研究认为，单独检测抗Ro52或抗Ro60其几乎没有价值[14, 15]，这与本研究结果相一致。
总之，抗Ro52与抗Ro60抗体是ENA抗体谱中最为常见的两种自身抗体，抗Ro60抗体在自身免疫性疾病及非自身免疫性疾病的阳性率较抗Ro52抗体高，前者的检测敏感度及自身免疫性疾病预示价值较抗Ro52抗体高，但总体而言，抗Ro52和抗Ro60均无诊断特异性，临床应用价值有限。
抗SSa抗体（即抗Ro抗体）作为抗可提取核抗原（ENA）抗体谱中的抗体之一，对于自身免疫性疾病的诊断具有重要的临床价值[1]。在临床实践中，通常采用将SSa作为固相抗原蛋白质印迹法进行抗SSa抗体检测。SSa抗原是小分子细胞质核糖核蛋白，是蛋白和小分子核糖核酸形成的复合物，其由相对分子质量分别为60×103和52×103的两种蛋白组成，即抗SSa抗体包括抗Ro52和抗Ro60两种自身抗体。但由于国内很多试剂生产商采用胸腺组织作为蛋白质印迹法检测抗SSa抗体固相抗原，而胸腺中缺少相对分子质量为60×103的抗原成分[2]，因此这种试剂只能检测抗Ro52抗体，过去国内外很多文献报道的抗SSa抗体主要指抗Ro52抗体。随着分子生物学技术的发展，重组纯化的Ro52和Ro60抗原检测两种不同抗体已逐渐应用于临床，但两种抗体的临床意义尚不甚明确。因此我们回顾性分析了2009年1月－2013年12月23 145例抗Ro52和抗Ro60抗体与其他自身抗体及患者临床信息的关系，以探讨其对临床疾病的诊断价值。现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
纳入2009年1月－2013年12月在四川大学华西医院及中国人民解放军第452医院同时检测抗核抗体（ANA）和ENA抗体，且ANA检测结果为阳性的患者23 145例，其中男3 857例，女19 288例，男女比例为1︰5.00。其中男2～92岁，平均51.3岁；女1～93岁，平均40.7岁。根据患者临床信息，分为自身免疫病确诊组2 340例，非自身免疫疾病确诊组1 601例，具有明确症状非确诊组2 059例，其余17 145例患者未查及临床信息。
1.2 研究方法
① 分析抗Sm、抗SSb、抗RNP、抗Scl-70、抗Jo-1、抗Rib-P 6种抗体出现阳性时抗Ro52和抗Ro60抗体阳性情况。
② 依据抗Ro52与抗Ro60抗体结果表现不同，将其分为4组，即抗Ro52抗体和抗Ro60抗体均为阳性（Ro52+Ro60+）、抗Ro52抗体阳性而抗Ro60抗体阴性（Ro52+Ro60-）、抗Ro52抗体阴性而抗Ro60抗体阳性（Ro52-Ro60+）以及抗Ro52抗体和抗Ro60抗体均为阴性（Ro52-Ro60-），以分析抗Ro52和抗Ro60抗体在自身免疫性疾病、非自身免疫性疾病及临床症状的分布情况，进一步推测单独抗体的致病作用。由于Ro52+Ro60+和Ro52-Ro60-时无法判断两者单个抗体的诊断价值及致病作用，因此在不同疾病与抗Ro52和抗Ro60关系分析中，本研究主要分析了Ro52-Ro60+及Ro52-Ro60+两种结果组合的比较关系。
1.3 检测方法
ENA抗体检测采用重组纯化抗原的蛋白质印迹法，可同时检测抗Sm、抗Ro52、抗Ro60、抗SSb、抗RNP、抗Scl-70、抗Jo-1、抗Rib-P 8种抗体，试剂盒购自德国欧蒙生物技术有限公司，试剂盒在效期内使用。
1.4 结果判断标准
将血清在反应槽中1︰100倍稀释，按试剂说明书操作。试剂条显色区带与标准带进行对照，显色判断相应的抗体为阳性，不显色则为阴性。
1.5 统计学方法
采用SPSS 19.0软件进行统计分析，分类资料的比较采用χ2检验，检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 抗Ro52和抗Ro60抗体与其余6种ENA抗体谱的关系
在23 145例患者中，ENA 8种自身抗体阳性率各不相同，抗Ro60抗体阳性率为35.19%（8 145/23 145），抗Ro52抗体阳性率为13.16%（3 046/23 145）。且抗Ro60抗体在抗SSb、抗RNP、抗Sm及抗Rib-P阳性患者中的阳性率较抗Ro52高（P＜0.05）；抗Jo-1及抗Scl-70阳性时，抗Ro52和抗Ro60的阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）。见表 1。
表1
抗Ro52和抗Ro60抗体与其余6种ENA抗体谱的关系[例（%）]
2.2 自身免疫性疾病与抗Ro52和抗Ro60关系
Ro52-Ro60+结果在自身免疫性疾病中所占比例较Ro52+Ro60-结果显著升高（P＜0.05）。具体疾病分布见表 2。
表2
不同自身免疫性疾病抗Ro52和抗Ro60组合的分布情况[例（%）]
2.3 非自身免疫性疾病与抗Ro52和抗Ro60关系
在1 601例确诊的非自身免疫性疾病患者中，由于疾病种类较多，为了分析抗Ro52与抗Ro60对靶器官的影响，本研究将累及器官分为肾脏、肝脏、肺部、心血管及恶性肿瘤等5类，其他累及器官的疾病如带状疱症、腹泻、脑梗死、尿路感染、急性胰腺炎等由于病例较少且很分散而未纳入分析。Ro52-Ro60+结果在肾脏、肝脏、肺部、心血管及恶性肿瘤各组中所占比例较Ro52+Ro60-结果较高（P＜0.05），详细结果见表 3。
表3
抗Ro52和抗Ro60不同结果组合在不同非自身免疫性疾病中的分布情况[例（%）]
2.4 临床症状与抗Ro52和抗Ro60关系
在2 059例表现不同的临床症状患者中，将疑诊为自身免疫性疾病的患者以临床症状进行分析；蛋白尿、黄疸、浮肿、腹痛、头痛、呕吐、红斑、肝功异常、血尿等临床症状由于病例较少未纳入分析。Ro52-Ro60+结果在各种症状的患者中所占比例较Ro52+Ro60-结果较高（P＜0.05），详细结果见表 4。
表4
抗Ro52和Ro60不同结果组合在不同临床症状在的分布情况[例（%）]
3 讨论
抗SSa抗体与干燥综合征（SS）有关，由于该自身抗体为SS相关的第一个抗体而得名，但其特异性不佳[3]，是目前已知的ENA抗体中分布最广、最常见的一种抗体[4]。抗SSa抗体包括抗Ro52和抗Ro60，两者阳性率均较高，本研究显示两者分别占ANA阳性病例的13.16%（3 046/23 145）和35.19%（8 145/23 145）。在临床实践中，作为SS诊断标准之一[5]，抗SSa抗体常结合抗SSb抗体一起诊断SS，以提高诊断特异性。抗SSb抗体常伴随抗SSa抗体一起出现，这是由于SSb抗原决定簇是SSa抗原的一部分[1]，但由于SSa抗原包括Ro52和Ro60两种抗原，SSb抗原与哪种抗原关系更密切还不明确。本研究将抗Ro52和抗Ro60抗体与ENA其余6种抗体相关关系进行了分析，表 1结果显示，抗Ro60抗体与抗SSb、抗RNP、抗Sm及抗Rib-P的阳性一致率较抗Ro52高，而抗SSb抗体与SS密切相关[6]，抗RNP为混合性结缔组织病（MCTD）的诊断标准之一[7]，抗Sm及抗Rib-P是诊断系统性红斑狼疮（SLE）的标志性抗体[8, 9]，提示抗Ro60抗体相对抗Ro52抗体而言，其对SS、MCTD及SLE可能具有较高的诊断预示性；但Retamozo等[10]认为抗Ro52抗体与SS的诊断价值更加特异，这与本研究结果不尽相同，需要进一步研究证实。
Tan等[4]报道，抗SSa抗体可出现在多种自身免疫性疾病如SLE、SS、类风湿关节炎（RA）、特发性血小板减少性紫癜（ITP）等患者血清中，且均有较高滴度。但由于当时技术原因，Tan[4]未说明其检测的抗SSa抗体具体是哪种抗体，因此，临床医生在应用两种抗SSa抗体时感到困惑，需进一步分析抗Ro52抗体及抗Ro60抗体的诊断价值。本研究表 2结果显示，在各种自身免疫性疾病中Ro52-Ro60+所占的比例较Ro52+Ro60-高，提示Ro52-Ro60+对自身免疫性疾病的诊断价值较Ro52+Ro60-高，而这些自身免疫性疾病中以SLE、RA及SS较多。这与表 1的分析结果基本一致，即Ro52-Ro60+与SLE的标志性抗体抗Sm及抗Rib-P阳性一致率较高，与SS的标志性抗体抗SSb也有较高的阳性一致率。但有研究认为认为抗Ro52对SS更加特异[11, 12]，今后应随机纳入SS患者以进一步分析。
抗Ro52与抗Ro60抗体除了在自身免疫疾病患者会出现阳性，其在非自身免疫性疾病患者也会出现阳性。本研究表 3结果显示，Ro52与Ro60均会出现累及各系统的非自身免疫性疾病，但Ro52-Ro60+在多种非自身免疫性疾病患者中的分布均高于Ro52+Ro60-，表明抗Ro60较抗Ro52抗体的阳性率较高但无疾病诊断特异性，对非自身免疫性疾病的诊断和鉴别诊断价值有限。但这些非自身免疫性疾病的患者可能就是因自身免疫造成器官损伤，只是尚未确诊而已。如SLE最易累及肾脏[13]，在本研究中，肾脏疾病患者较多，可能部分就是由于自身免疫性疾病累及肾脏所引起。在未确诊的症状患者组，疑似自身免疫性疾病患者Ro52-Ro60+比例较Ro52+Ro60-高，因此，我们推测Ro52-Ro60+具有发展为自身免疫性疾病的可能性。虽Ro52+Ro60-阳性率较低，但对于疾病诊断价值而言其无疾病特异性。可能由于抗Ro60和抗Ro52抗体结合靶向抗原的特异性较差，因此表现症状及疾病分布广泛，造成疾病及症状广泛性分布。有研究认为，单独检测抗Ro52或抗Ro60其几乎没有价值[14, 15]，这与本研究结果相一致。
总之，抗Ro52与抗Ro60抗体是ENA抗体谱中最为常见的两种自身抗体，抗Ro60抗体在自身免疫性疾病及非自身免疫性疾病的阳性率较抗Ro52抗体高，前者的检测敏感度及自身免疫性疾病预示价值较抗Ro52抗体高，但总体而言，抗Ro52和抗Ro60均无诊断特异性，临床应用价值有限。
