目的  通過研究鋅指Krüppel 樣轉(zhuǎn)錄因子2( Klf2) 及紅系衍生核因子相關(guān)因子2 ( Nrf2) /BTB-CNC 異體同源體1( Bach1) 在經(jīng)香煙煙霧提取物( CSE) 刺激的大鼠氣道上皮細(xì)胞中的表達(dá), 了解其感受氧化應(yīng)激對(duì)靶基因γ-谷氨酰半胱氨酸合酶( γ-GCS) 的調(diào)控作用。
方法  采用酶消化法提取大鼠原代氣管-支氣管上皮細(xì)胞, 并用10% CSE 干預(yù)細(xì)胞6 h, 收集細(xì)胞, 雙酶法檢測(cè)γ-GCS 活性; 通過免疫細(xì)胞化學(xué)法觀察Nrf2 /Bach1 的核轉(zhuǎn)位; 采用Western blot 和RT-PCR 技術(shù)研究細(xì)胞中 Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS 的蛋白及mRNA 表達(dá)。
結(jié)果  大鼠氣管-支氣管上皮細(xì)胞經(jīng)CSE 誘導(dǎo)后其 γ-GCS活性明顯增高。免疫細(xì)胞化學(xué)結(jié)果顯示Nrf2 經(jīng)CSE 刺激后出現(xiàn)由核外向核內(nèi)的轉(zhuǎn)位, Bach1 經(jīng)CSE 刺激后出現(xiàn)由核內(nèi)向核外的轉(zhuǎn)位。Western blot 結(jié)果顯示CSE 處理組中Klf2、Nrf2、Bach1、 γ-GCS蛋白水平較對(duì)照組顯著升高( P lt;0.05) ; RT-PCR 結(jié)果顯示CSE 處理組中Klf2、Nrf2、Bach1、 γ-GCS mRNA 水平較對(duì)照組顯著升高( P lt;0.05) 。直線相關(guān)分析表明γ-GCS 蛋白表達(dá)與Klf2、Nrf2、 Bach1 呈正相關(guān)( P lt;0.05) 。
結(jié)論  CSE 可能通過轉(zhuǎn)錄因子Klf2、Nrf2、Bach1 調(diào)節(jié)γ-GCS 的表達(dá)。

引用本文： 黃暢宇,戴愛國(guó). 轉(zhuǎn)錄因子Klf2 和Nrf2 /Bach1 調(diào)控γ-谷氨酰半胱氨酸合酶在氣道上皮細(xì)胞中的作用. 中國(guó)呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志, 2012, 11(1): 23-27. doi: 復(fù)制