摘要： 目的 通過(guò)分析風(fēng)濕性心臟病二尖瓣狹窄患者心房肌組織超級(jí)化激活環(huán)核苷酸調(diào)控通道基因家族4（HCN4）基因表達(dá)與心房顫動(dòng)發(fā)生
的關(guān)系，為探討心房顫動(dòng)發(fā)生的機(jī)制奠定理論基礎(chǔ)。 方法 52例風(fēng)濕性二尖瓣狹窄患者，根據(jù)是否合并心房顫動(dòng)將其分為兩組，實(shí)驗(yàn)組：38例，男18例，女20例；年齡26~68歲，平均年齡46.47歲；均合并心房顫動(dòng)。對(duì)照組：14例，男6例，女8例；年齡21~62歲，平均年齡42.93歲；不合并心房顫動(dòng)。提取并逆轉(zhuǎn)錄兩組患者心房肌組織中HCN4基因的總核糖核酸（RNA）,應(yīng)用SYBR GreenⅠ熒光染料, 建立檢測(cè) HCN4基因信使RNA（mRNA）的實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng) （PCR）法，并對(duì)PCR產(chǎn)物測(cè)序進(jìn)行分析。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出兩組心房肌組織中HCN4基因 mRNA含量,并以HCN4基因mRNA和內(nèi)參β肌動(dòng)蛋白（β-actin）含量的比值作為評(píng)價(jià)HCN4基因mRNA表達(dá)水平指標(biāo)。 結(jié)果 測(cè)定HCN4基因cDNA 序列同源性為100%。建立的實(shí)時(shí)熒光定量 PCR方法在103～107拷貝數(shù)/μl的標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋范圍內(nèi)r為0.999。實(shí)驗(yàn)組HCN4基因mRNA與β-actin含量的相對(duì)表達(dá)值比值與對(duì)照組比較明顯升高(1.323±1.226 vs. 0.116±0.192,P＜0.05)。 結(jié)論 實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)HCN4基因mRNA能進(jìn)行準(zhǔn)確定量，HCN4基因的過(guò)度轉(zhuǎn)錄表達(dá)提示其可能參與了調(diào)控風(fēng)濕性二尖瓣狹窄心房顫動(dòng)的發(fā)生過(guò)程。
引用本文： 楊濤,周華富,冼磊,等. 風(fēng)濕性二尖瓣狹窄心房顫動(dòng)患者HCN4基因cDNA序列測(cè)定及mRNA的表達(dá). 中國(guó)胸心血管外科臨床雜志, 2010, 17(2): 171-173. doi: 復(fù)制