目的 觀察外源性p16基因質(zhì)粒導(dǎo)入食管癌患者食管鱗癌細(xì)胞系Ec109后的表達(dá)及其對Ec109細(xì)胞增殖生長狀況的影響。方法 根據(jù)轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的不同或是否行p16 cDNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染分為三組,每組分別為5個樣本。PcDNA3-P16轉(zhuǎn)染組(P16轉(zhuǎn)染組):采用脂質(zhì)體(Lipofectamine)為載體,將PcDNA3-P16表達(dá)質(zhì)粒導(dǎo)入Ec109細(xì)胞;空載體轉(zhuǎn)染組:用PcDNA3-neo空載體以上述相同方法轉(zhuǎn)染,作空白對照;未轉(zhuǎn)染組:未用PcDNA3-P16質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,作陰性對照。應(yīng)用Northern斑點(diǎn)雜交、免疫組織化學(xué)、免疫熒光檢測轉(zhuǎn)化細(xì)胞的P16蛋白變化;流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期變化,DNA片段化電泳檢測細(xì)胞凋亡。結(jié)果 P16轉(zhuǎn)染組外源性p16基因在Ec109細(xì)胞中表達(dá)后,細(xì)胞生長速度減慢,克隆形成能力下降,瞬時表達(dá)時有細(xì)胞凋亡發(fā)生,穩(wěn)定表達(dá)后細(xì)胞存在G1期阻滯;空載體轉(zhuǎn)染組和未轉(zhuǎn)染組均未觀察到以上結(jié)果。結(jié)論 脂質(zhì)體介導(dǎo)的外源性p16基因轉(zhuǎn)染對Ec109細(xì)胞有生長抑制作用,p16基因瞬時表達(dá)可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
引用本文: 孫曉雁,劉錕,李謹(jǐn)革. 外源性p16基因?qū)κ彻馨┗颊甙┘?xì)胞系的生長抑制作用. 中國胸心血管外科臨床雜志, 2001, 8(3): 150-153. doi: 復(fù)制