目的 探討TGF-β3 基因修飾后退變髓核細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)以及植入兔退變椎間盤后對退變椎間盤的影響。 方法 將重組腺病毒載體Ad-TGF-β3 與第2 代退變髓核細(xì)胞按10 ∶ 1 比例混合培養(yǎng)轉(zhuǎn)染（Ad-TGF-β3 組），待細(xì)胞融合后傳代，MTT 檢測轉(zhuǎn)染細(xì)胞增殖活性，Western blot 檢測TGF-β3 蛋白含量，免疫細(xì)胞化學(xué)染色觀察對數(shù)生長期轉(zhuǎn)染細(xì)胞Ⅱ型膠原染色陽性率；采用病毒空載體轉(zhuǎn)染髓核細(xì)胞（Adv 組）和未經(jīng)轉(zhuǎn)染髓核細(xì)胞（空白組）作為對照。取30 只新西蘭兔，體重3.2 ～ 3.5 kg，雌雄不限，通過針刺L3、4、L4、5 和L5、6 椎間盤制備椎間盤退變模型。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按照隨機(jī)數(shù)字法分為3 組，轉(zhuǎn)染細(xì)胞組（A 組，n=12）、退變細(xì)胞組（B 組，n=12）和空白對照組（C 組，n=6）。A、B 組將100 μL 濃度為1 × 105 個(gè)/mL 對應(yīng)細(xì)胞懸液注射入退變椎間盤，C 組同法注入等量PBS。注射后6、10、14 周取A、B 組各4 只、C 組2 只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死，取L3、4、L4、5 和L5、6 椎間盤行組織學(xué)觀察，RT-PCR 檢測Ⅱ型膠原和蛋白多糖mRNA 表達(dá)。 結(jié)果 Ad-TGF-β3轉(zhuǎn)染后髓核細(xì)胞活性明顯改善；轉(zhuǎn)染后3、7、14 d，TGF-β3在髓核細(xì)胞內(nèi)表達(dá)逐漸升高；Ad-TGF-β3 組髓核細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)內(nèi)見棕黃色Ⅱ型膠原陽性染色，陽性率顯著高于Adv 組及空白組（P  lt; 0.05）。組織學(xué)觀察示，A 組椎間盤退變程度較B、C組明顯減輕。6、10、14 周A組Ⅱ型膠原和蛋白多糖mRNA表達(dá)顯著高于B、C組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P  lt; 0.05）。 結(jié)論 TGF-β3 基因修飾退變髓核細(xì)胞后可明顯改善細(xì)胞生物活性，轉(zhuǎn)染后髓核細(xì)胞植入兔體內(nèi)可明顯增加退變椎間盤的基質(zhì)分泌。

引用本文： 宋希元,彭圣智. TGF-β3 修飾退變髓核細(xì)胞移植修復(fù)兔退變椎間盤的效果觀察. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2012, 26(7): 790-795. doi: 復(fù)制