許文靜 1 , 趙喆 2 , 趙斌 1 , 王玉 1 , 彭江 1 , 張莉 1 , 陳繼鳳 1 , 盧世璧 1
  • 1 解放軍總醫(yī)院全軍骨科研究所(北京,100853);;
  • 2 武警總醫(yī)院骨科;

目的 BMSCs 作為雪旺細(xì)胞的替代細(xì)胞可提高周圍神經(jīng)損傷修復(fù)效果,但目前對(duì)于神經(jīng)支架內(nèi)添加適宜的種子細(xì)胞數(shù)量未達(dá)成共識(shí)。研究不同數(shù)量BMSCs 對(duì)大鼠背根神經(jīng)節(jié)(dorsal root ganglion,DRG)生長的影響。 方法 取4 周齡雄性SD 大鼠3 只,體重80 ~ 100 g,體外培養(yǎng)擴(kuò)增BMSCs。取新生1 ~ 2 日齡 SD 大鼠3 只,雌雄不限,體重4 ~ 6 g,制備DRG。取第3 代BMSCs 制備BMSCs- 生物蛋白膠復(fù)合物,按照加入細(xì)胞數(shù)量的不同,將實(shí)驗(yàn)分為A組(1 ×103 個(gè))、B 組(1 × 104 個(gè))、C 組(1 × 105 個(gè))和D 組(0 個(gè)),并與SD 大鼠DRG 共培養(yǎng)。48 h 后通過形態(tài)學(xué)觀察,神經(jīng)絲蛋白200 和雪旺細(xì)胞S-100 免疫熒光染色,對(duì)SD 大鼠DRG 軸突生長長度、雪旺細(xì)胞遷移距離和軸突面積指數(shù)進(jìn)行定量評(píng)價(jià)。 結(jié)果 48 h 后可見各組BMSCs 生長出多個(gè)長突起;雪旺細(xì)胞移行和軸突從DRG 長出,呈多方向性生長;BMSCs生物蛋白膠具有生物活性且影響DRG 生長。A、B、C 組DRG 軸突生長長度及雪旺細(xì)胞遷移距離均明顯大于D 組(P  lt; 0.05),C 組小于B 組(P  lt; 0.05),A、C 組間及A、B 組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05)。A、B 組軸突面積指數(shù)明顯大于D組(P  lt; 0.05),C 組大于D 組但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05),A、B、C 組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05)。 結(jié)論 乳鼠DRG 體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),可作為研究周圍神經(jīng)損傷修復(fù)的體外模型。不同數(shù)量BMSCs 生物蛋白膠復(fù)合物對(duì)DRG 生長的影響具有量效關(guān)系,為組織工程神經(jīng)選用合適數(shù)量BMSCs 提供了理論依據(jù)。

引用本文: 許文靜,趙喆,趙斌,王玉,彭江,張莉,陳繼鳳,盧世璧. 不同數(shù)量BMSCs 對(duì)大鼠背根神經(jīng)節(jié)生長影響的實(shí)驗(yàn)研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(10): 1245-1249. doi: 復(fù)制