目的 探討血小板裂解液（platelet lysate，PL）在體外定向誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（human umbilical cord derived mesenchymal stem cells，hUCMSCs）分化成軟骨細(xì)胞中的作用。 方法 取健康產(chǎn)婦自愿捐贈臍帶，采用膠原酶消化法分離hUCMSCs，體外培養(yǎng)擴增，流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞表型鑒定。根據(jù)加入誘導(dǎo)培養(yǎng)基成分不同將實驗分為以下3 組：A 組為H-DMEM 培養(yǎng)基、10%FBS 及10%PL，B 組為H-DMEM 培養(yǎng)基、10%FBS、10 ng/mL TGF-β1、1 ×10-7 mol/L 地塞米松、50 μg/mL 維生素C 及1% 胰島素鐵硒傳遞蛋白（insulin-transferrin-selenium，ITS），C 組為 H-DMEM培養(yǎng)基、10%FBS、10 ng/mL TGF-β1、1 × 10-7 mol/L 地塞米松、50 μg/mL 維生素C、1%ITS 及10%PL。誘導(dǎo)培養(yǎng)2 周，甲苯胺藍(lán)染色檢測各組軟骨細(xì)胞基質(zhì)的分泌，免疫熒光檢測軟骨特異性Ⅱ型膠原表達(dá)，半定量RT-PCR 檢測蛋白聚糖（Aggrecan）和Ⅱ型膠原表達(dá)。 結(jié)果 分離得到的hUCMSCs 不表達(dá)造血細(xì)胞的表面標(biāo)記CD45、CD34 和HLA-DR，而表達(dá)黏附分子和MSCs 表面標(biāo)記CD44、CD105 和CD146。甲苯胺藍(lán)染色和Ⅱ型膠原免疫熒光染色示C 組呈陽性，B 組呈弱陽性，而A 組均呈陰性。半定量RT-PCR 檢測示Aggrecan 和Ⅱ型膠原在B、C 組中均有表達(dá)，A 組中未見表達(dá)；C 組Aggrecan mRNA 和Ⅱ型膠原mRNA 表達(dá)明顯高于B 組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 單純10%PL 不能誘導(dǎo)hUCMSCs 成軟骨分化，但它可當(dāng)作成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基的輔助添加劑，對hUCMSCs 成軟骨分化有明顯促進(jìn)作用，為構(gòu)建組織工程軟骨提供了新的可利用條件。
引用本文： 馮學(xué)濤,田少奇,孫康,張積華,張才龍,劉世海,周明,呂江濤. 血小板裂解液對人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外成軟骨分化的影響. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(10): 1250-1255. doi: 復(fù)制
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