• 南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院創(chuàng)傷骨科(廣州,510515);

目的 觀察外源性降鈣素基因相關肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在大鼠BMSCs 遷移中的作用及對VEGF、血管黏附分子1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)表達的影響,探討CGRP 通過BMSCs促進血管生成的作用機制。 方法 全骨髓法分離、培養(yǎng)SD 大鼠BMSCs,采用Western blot 法于傳代培養(yǎng)1、2、3 周時檢測BMSCs 中CGRP 受體(CGRP receptor,CGRPR)蛋白的表達。使用濃度為1 × 10-8 mol/L 的CGRP 作用于BMSCs作為實驗組,單純BMSCs 作為對照組,在培養(yǎng)72 h 時采用細胞趨化實驗檢測CGRP 對BMSCs 遷移的影響;在培養(yǎng)1、3、5、7 d 采用實時熒光定量PCR 檢測CGRP 作用后VCAM-1 mRNA 的表達變化,采用免疫細胞化學染色、Western blot 法檢測CGRP 作用后VEGF 的表達變化。 結果 Western blot 檢測示BMSCs 穩(wěn)定表達CGRPR,2 周時表達最高。細胞趨化實驗顯示,實驗組CGRP 刺激后穿膜遷移細胞數(3.20 ± 1.77)個/HP,較對照組(1.11 ± 0.49)個/HP 明顯增多(t=4.230,P=0.001)。實時熒光定量PCR 檢測示,實驗組VCAM-1 mRNA 表達隨時間延長逐漸增加,7 d 時最高;實驗組3、5、7 d的VCAM-1 mRNA 表達量與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P  lt; 0.05)。免疫細胞化學染色示,培養(yǎng)1、3 d 兩組均無陽性染色;培養(yǎng)5、7 d 實驗組VEGF 染色呈陽性,對照組無陽性染色。Western blot 檢測示,培養(yǎng)1、3 d 兩組均未檢測到VEGF蛋白表達;培養(yǎng)5、7 d 實驗組VEGF 蛋白表達量均明顯高于對照組(P  lt; 0.05);實驗組5 d 的VEGF 蛋白表達量明顯高于7 d(P  lt; 0.05)。 結論 CGRP 能促進BMSCs 遷移及VEGF 表達,這可能是CGRP 調節(jié)骨內部血流變化而影響骨代謝的機制之一。

引用本文: 王釗,金丹,陀泳華,郭小磊,文軍,周健,夏立恒,張永濤. 降鈣素基因相關肽促進大鼠BMSCs 遷移及VEGF 的表達. 中國修復重建外科雜志, 2011, 25(11): 1371-1376. doi: 復制