• 1 溫州醫(yī)學(xué)院信息工程學(xué)院(浙江溫州,325035);;
  • 2 第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所皮膚科;;
  • 3 中國(guó)藥品生物制品檢定所醫(yī)療器械中心;

目的 探討人表皮細(xì)胞與聚碳酸脂膜構(gòu)建組織工程表皮模型的方法,建立可用于皮膚刺激試驗(yàn)的組織工程表皮模型。 方法 應(yīng)用組織工程方法,以聚碳酸脂膜為支架,以人皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞為細(xì)胞來(lái)源,構(gòu)建組織工程表皮模型。氣液面培養(yǎng)13 d,通過(guò)HE 染色、角蛋白10(keratin 10,K10)和K13 抗體、K14 抗體、層粘連蛋白抗體、角化細(xì)胞交聯(lián)外膜蛋白抗體、中間絲相關(guān)蛋白抗體免疫熒光染色、透射電鏡觀察組織工程表皮模型組織結(jié)構(gòu)。采用快速滲透試驗(yàn)方法,SDS 分別作用于培養(yǎng)基中添加脂質(zhì)物(實(shí)驗(yàn)組)和未添加脂質(zhì)物(對(duì)照組)的組織工程表皮模型18 h,測(cè)定組織活性減小50% 所需化學(xué)物質(zhì)的濃度(half maximal inhibitory concentration of a substance,IC50)值。 結(jié)果 HE 染色、免疫熒光染色及透射電鏡觀察顯示,構(gòu)建的組織工程表皮模型分化良好,具有與正常表皮相似的結(jié)構(gòu):基底膜、棘層、顆粒層和角化層。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組組織工程表皮模型的IC50 值分別為0.183%(6.00 mmol/L)和0.072%(2.36 mmol/L)。 結(jié) 論 在聚碳酸酯膜上構(gòu)建的組織工程表皮模型具有與正常表皮相似的組織結(jié)構(gòu),并且具有一定的屏障功能。

引用本文: 李中良,伍津津,楊桂紅,奚廷斐,王春仁,陳亮. 用于替代皮膚刺激試驗(yàn)的組織工程表皮模型的構(gòu)建研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(2): 129-132. doi: 復(fù)制