• 1 廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院整形外科(廣州,510010);;
  • 2 暨南大學附屬第一醫(yī)院整形外科;;
  • 3 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院全軍創(chuàng)傷修復重點實驗室;

目的 表皮干細胞(epidermal stem cells,ESCs)在體內(nèi)的微環(huán)境十分復雜,雌激素可能是主要的參與者。探討雌激素對體外培養(yǎng)的hESCs 增殖與遷移的影響。 方法 取自愿捐贈的正常人包皮標本,采用密度梯度離心法分離培養(yǎng)hESCs,并傳至第2 代。流式細胞儀檢測第2 代hESCs 整合素β1、細胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)、CK14和CK10 抗原表達以鑒定hESCs。取第2 代hESCs 2 × 106 個分別用含0.1 nmol/L 雌激素的ESCs 專用培養(yǎng)基(A 組)、含10 nmol/L 雌激素受體阻斷劑的ESCs 專用培養(yǎng)基(B 組)以及普通ESCs 專用培養(yǎng)基(C 組)進行培養(yǎng);于培養(yǎng)后24 h 刮擦生長融合成片的hESCs,制備寬度為100 μm 的體外單層hESCs 損傷模型。于模型制備后24、48、72 h,倒置相差顯微鏡下觀察各組表皮創(chuàng)面愈合情況(即hESCs 遷移情況),并計算模型制備后72 h 各組創(chuàng)面愈合率;于模型制備后24、48、72、96、120 h,采用MTT 法檢測hESCs 分裂增殖活性。 結(jié)果 原代培養(yǎng)的hESCs 貼壁呈單層卵圓形、集落樣生長。流式細胞儀檢測第2 代hESCs 的整合素β1、CK19、CK14 呈陽性標記,陽性率分別為96.63%、95.47%、94.27%;CK10 呈陰性標記,陽性率為1.32%。模型制備后24、48、72 h,各組均可見hESCs 遷移越過創(chuàng)緣,其中A 組越過創(chuàng)緣的細胞數(shù)多于B、C 組,C 組多于B 組;模型制備后72 h,A、B、C 組創(chuàng)面愈合率分別為69.00% ± 0.05%、35.00% ± 0.05%、48.00% ± 0.06%,組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P  lt; 0.05)。模型制備后24、48、72、96 和120 h,A 組hESCs 分裂增殖活性高于B、C 組,C 組高于B 組,差異均有統(tǒng)計學意義(P  lt; 0.01)。 結(jié)論 雌激素具有促進hESCs 分裂增殖和遷移的作用,并藉此可能參與皮膚諸多的生物學作用。

引用本文: 陳小波,程飚,劉宏偉,孫同柱,付小兵. 雌激素對人表皮干細胞增殖與遷移影響的體外實驗. 中國修復重建外科雜志, 2011, 25(2): 134-138. doi: 復制