• 中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院肝膽外科(長(zhǎng)沙,413000);

人羊膜上皮細(xì)胞(human amniotic epithelial cells,hAECs)具有干細(xì)胞特性及分化為成熟肝細(xì)胞的潛能,有望成為肝細(xì)胞移植理想的種子細(xì)胞。研究hAECs 移植入肝受損裸小鼠脾臟后的存活、遷移情況,探討其肝細(xì)胞特性的表達(dá)。 方法 取順產(chǎn)產(chǎn)婦自愿捐贈(zèng)胎盤(pán)分離培養(yǎng)hAECs。30 只6 ~ 8 周齡裸小鼠,雌雄各半,體重20 ~ 22 g。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為A、B、C 3 組,每組10 只。A、C 組制備肝切除(常規(guī)切除2/3 肝)模型,B 組僅開(kāi)腹但未行肝葉切除;術(shù)后A、B 組分別自脾下極移植細(xì)胞密度為5 × 106 個(gè) /mL 腺相關(guān)病毒(adeno-associated virus,AAV)載體介導(dǎo)綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因標(biāo)記的第3 代hAECs 0.2 mL,C 組注射等量生理鹽水。4 周后處死動(dòng)物,取肝、脾、心、肺、腦、腎行大體觀察,冰凍切片行組織學(xué)及免疫熒光檢測(cè),追蹤hAECs 存活、遷移及肝細(xì)胞特性表達(dá)。 結(jié)果 3 組裸小鼠肝及脾組織未見(jiàn)異常癌性結(jié)節(jié)及腫塊,HE 染色未見(jiàn)腫瘤細(xì)胞。A 組肝及脾組織HE 染色可見(jiàn)大量類(lèi)圓形、胞質(zhì)少、核大而深染的細(xì)胞;B、C 組肝、脾組織及3 組腎、心、肺、腦組織均未見(jiàn)異常細(xì)胞。熒光顯微鏡下A 組肝、脾組織中均發(fā)現(xiàn)綠色熒光信號(hào)的hAECs,且大部分表達(dá)白蛋白;B、C 組肝、脾組織及3 組腎、心、肺、腦組織未見(jiàn)綠色熒光細(xì)胞。 結(jié)論 AAV- GFP 轉(zhuǎn)染后的hAECs 移植入肝受損裸小鼠體內(nèi)可存活并保持部分肝細(xì)胞特性。

引用本文: 羅宏武,黃湘俊,黃飛舟,劉潯陽(yáng). 人羊膜上皮細(xì)胞橫向分化及脾內(nèi)移植的初步研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(2): 144-148. doi: 復(fù)制