• 昆明醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院 云南省腫瘤醫(yī)院(昆明,650118)1 胸外科 云南省腫瘤研究所肺癌研究中心,3 云南省腫瘤研究所分子生物學(xué)實驗室,4 檢驗科細菌室;;
  • 2 昆明醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院胸心血管外科;

目的 表皮葡萄球菌胞間黏附素基因(intercellar adhesion,ica)是細菌聚集的關(guān)鍵因子,通過分析醫(yī)源性表皮葡萄球菌生物膜基因型,探討ica 操縱子在聚氯乙烯(polyvinyl chloride,PVC)材料表面細菌生物膜形成中的作用。 方法 取56 株醫(yī)源性表皮葡萄球菌臨床分離株,應(yīng)用PCR 法、基因測序技術(shù)檢測細菌生物膜形成相關(guān)基因,包括16S rRNA、自溶素(autolysin,atlE)、纖維蛋白原結(jié)合蛋白(fibrinogen binding protein,fbe)以及ica。取醫(yī)源性表皮葡萄球菌制備濃度為1 × 105 cfu/mL 的細菌懸液,并根據(jù)目的基因檢測結(jié)果,分別以icaADB、atlE、fbe 陽性基因型(ica 操縱子陽性組)以及icaADB 陰性而atlE、fbe 陽性基因型(ica 操縱子陰性組)與PVC 材料培養(yǎng)。于6、12、18、24、30 h 各取2 個PVC 材料,進行激光共聚焦顯微鏡及掃描電鏡觀察,測量單位視野細菌群落數(shù)量及形成的細菌生物膜厚度。 結(jié) 果 目 的 基因檢測示,醫(yī)源性表皮葡萄球菌16S rRNA 陽性率為100%(56/56);icaADB、atlE、fbe 陽性基因型菌株占57.1%(32/56);icaADB 陰性而atlE、fbe 陽性基因型菌株占37.5%(21/56)。測序結(jié)果示,目的基因16S rRNA、atlE、fbe、icaADB 擴增產(chǎn)物序列分別與GenBank 中基因序列相符。隨時間延長,ica 操縱子陰性組的PVC 材料表面無明顯細菌生物膜形成;ica 操縱子陽性組的PVC 材料表面細菌群落數(shù)量逐漸增多,細菌生物膜體積逐漸增大,24 h 時可見成熟的細菌生物膜結(jié)構(gòu),30 h 時細菌生物膜體積趨于穩(wěn)定。培養(yǎng)各時間點ica 操縱子陽性組PVC 材料表面單位視野細菌群落數(shù)量(F=435.987,P=0.000)及細菌生物膜厚度(F=6 714.395,P=0.000)明顯高于ica 操縱子陰性組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論 醫(yī)源性表皮葡萄球菌可以分為ica 操縱子陰性和ica 操縱子陽性兩類細菌;ica 操縱子可以增加PVC 材料表面細菌生物膜的形成能力、細菌群落數(shù)量及細菌生物膜厚度,在PVC 材料表面細菌生物膜形成中具有重要作用。

引用本文: 葉聯(lián)華,黃云超,許賡,楊達寬,劉馨,周友全,郭鳳麗. 醫(yī)源性表皮葡萄球菌胞間黏附素基因操縱子在聚氯乙烯材料表面細菌生物膜形成中的作用研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(4): 466-471. doi: 復(fù)制