目的?探討生長分化因子7(growth differentiation factor 7,GDF-7)在體外能否促進BMSCs向肌腱細胞分化,為改善BMSCs修復(fù)肌腱療效提供依據(jù)。?方法?采用密度梯度離心法從綠熒光大鼠骨髓組織中分離培養(yǎng)BMSCs,通過成骨、成脂和成軟骨分化鑒定其多向分化能力。取第3代BMSCs根據(jù)成肌腱培養(yǎng)液中加入不同濃度GDF-7(0、12.5、25.0、50.0 ng/mL),分為A、B、C、D組。體外誘導(dǎo)培養(yǎng)2周后,實時熒光定量PCR檢測各組scleraxis、tenomodulin、tenascin C和Ⅰ型膠原mRNA表達,免疫細胞化學染色觀察tenomodulin、tenascin C和Ⅰ型膠原蛋白表達,Western blot法檢測A、C組tenomodulin蛋白的表達。?結(jié)果?經(jīng)鑒定,分離培養(yǎng)的BMSCs具有成骨、成脂和成軟骨分化的多向分化能力。實時熒光定量PCR檢測結(jié)果示,B、C、D組的tenomodulin mRNA表達分別較A組增加了2.85、3.41、3.07倍(P lt; 0.05),scleraxis mRNA表達增加了2.13、1.50、2.56倍(P lt; 0.05),tenascin C mRNA表達增加了2.45、2.86、1.88倍(P lt; 0.05),但B、C、D組間比較差異均無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05)。B、C組Ⅰ型膠原mRNA表達較A組分別增高了1.92和2.45倍(P lt; 0.05);D組較A組有所增高,但差異無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05)。免疫細胞化學染色示,B、C、D組均有tenomodulin、tenascin C 和Ⅰ型膠原蛋白表達,而A組均未表達;除C組Ⅰ型膠原表達高于B、D組外,其他蛋白表達B、C、D組間無明顯差異。Western blot檢測示C組比A組有更高的tenomodulin蛋白表達。?結(jié)論?GDF-7在體外能促進大鼠BMSCs向肌腱細胞分化。
引用本文: 倪明,芮云峰,陳啟明,王巖,李剛. 生長分化因子7體外促進BMSCs向肌腱細胞分化的研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(9): 1103-1109. doi: 復(fù)制
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