• 1 蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院脊柱外科(蘭州, 730050);;
  • 2 嘉峪關(guān)市第二人民醫(yī)院藥械科;

目的 觀察經(jīng)蛛網(wǎng)膜下腔不同次數(shù)移植的 BMSCs 在 Wistar 大鼠損傷脊髓內(nèi)的存活、遷移及對(duì)大鼠脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)修復(fù)的作用,探討 BMSCs 移植的最佳次數(shù)。? 方法 8 只 2 月齡 Wistar 大鼠,體重約120 g。取股骨骨髓體外分離培養(yǎng)第 2 代 BMSCs,用 Hoechst 33342 標(biāo)記。另取 75 只成年 Wistar 大鼠體重約 220 g,采用改良Allen法制備T9、 10 SCI模型。隨機(jī)分為5組(n=15), A組經(jīng)蛛網(wǎng)膜下腔置管移植1次1 × 107個(gè)/mL BMSCs懸液0.1 mL(術(shù)后 1 周), B 組 2 次(術(shù)后 1、 3 周), C 組 3 次(術(shù)后 1、 3、 5 周), D 組 5 次(術(shù)后 1、 3、 5、 7、 9 周), E 組于術(shù)后 1、 3、 5、 7、9 周各注入 0.2 mL PBS 作為空白對(duì)照。SCI 術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)行大鼠后肢 Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)評(píng)分評(píng)價(jià)神經(jīng)功能狀況,并行熒光顯微鏡、 HE 染色、免疫組織化學(xué)染色觀察 BMSCs 在體內(nèi)遷移、存活及分化情況。? 結(jié)果 術(shù)后 3 周,A ~ D 組 BBB 評(píng)分均有明顯增加,與 E 組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  lt; 0.01)。術(shù)后 7、9、12 周,C、D 組 BBB 評(píng)分均明顯高于 A、B 組(P  lt; 0.01),B 組高于 A 組(P  lt; 0.01)。各時(shí)間點(diǎn) C、D 組間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05)。熒光顯微鏡觀察示術(shù)后 3 周,移植的 BMSCs 存活于損傷脊髓邊緣, A 組細(xì)胞數(shù)達(dá)高峰;隨后 A 組細(xì)胞數(shù)逐漸減少, B、 C、 D 組分別于術(shù)后5、 7、 7周細(xì)胞數(shù)達(dá)高峰后逐漸下降。12周C、 D組存活細(xì)胞數(shù)顯著多于A、 B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  lt; 0.01);各時(shí)間點(diǎn)C、 D組間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05)。 HE染色示術(shù)后3周損傷脊髓形成的空洞A、 B、 C、 D組逐漸減小,12 周 C、 D 組空洞最小, A、 B 組次之, E 組最大。免疫組織化學(xué)染色示神經(jīng)絲蛋白 200(neuroflament 200, NF-200)細(xì)胞數(shù)變化趨勢(shì)與 BMSCs 存活細(xì)胞數(shù)類似。術(shù)后 12 周 NF-200 陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在 C、D 組表達(dá)較 A、B 組明顯;神經(jīng)元樣細(xì)胞發(fā)出的神經(jīng)絲穿過(guò)損傷區(qū)在C、 D組最明顯, A、 B組較少。 ? 結(jié)論 多次移植BMSCs更有利于SCI修復(fù),移植以3次為最好。

引用本文: 李輝映,文益民,羅亞麗,藍(lán)旭,汪大彬,孫振剛,胡凌云. 不同次數(shù)移植 BMSCs 修復(fù)脊髓損傷的比較研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2010, 24(2): 180-184. doi: 復(fù)制