目的 進(jìn)一步研究血管內(nèi)皮細(xì)胞（vascular endothelial cells，VECs）和脂肪干細(xì)胞（adipose-derived stromal cells，ADSCs）聯(lián)合培養(yǎng)對(duì)ADSCs 成骨分化的影響，為聯(lián)合培養(yǎng)VECs 和ADSCs 作為骨組織工程種子細(xì)胞的可能性提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 分別自足月妊娠SD 大鼠和18 周齡SD 大鼠制備臍血來源的VECs 和ADSCs，行形態(tài)學(xué)觀察及免疫熒光染色鑒定。取第3 代ADSCs 與誘導(dǎo)培養(yǎng)6 周的VECs 按細(xì)胞比例分別為3 ∶ 1、1 ∶ 1 和1 ∶ 3 設(shè)為實(shí)驗(yàn)組A、B、C 組，ADSCs、VECs 單獨(dú)培養(yǎng)設(shè)為對(duì)照組D、E 組。培養(yǎng)第7、14 天取各組細(xì)胞行ALP 和飽和茜素紅鈣染色，進(jìn)行ALP 和骨鈣定性檢測；第4、7、14 天定量測定各組細(xì)胞ALP 和骨鈣素（osteocalcin，OC）含量。 結(jié)果 誘導(dǎo)培養(yǎng)6 周的臍血來源VECs 可見短梭形和多角形細(xì)胞混合生長，免疫熒光染色可見血管性血友病因子為陽性。ADSCs 培養(yǎng)可見貼壁單個(gè)核細(xì)胞形態(tài)單一，呈梭形生長，無重疊現(xiàn)象；免疫熒光染色可見CD90+。各組細(xì)胞培養(yǎng)第7 天，ALP 染色示A、D、E 組呈陰性反應(yīng)，B、C 組可見部分陽性細(xì)胞；第14 天時(shí)D、E 組仍呈陰性反應(yīng)，A、B、C 組可見片狀陽性細(xì)胞。培養(yǎng)第7 天，茜素紅染色示各組均未發(fā)現(xiàn)紅色陽性細(xì)胞；第14 天時(shí)A、B、C 組可見極少數(shù)陽性細(xì)胞，D、E 組未發(fā)現(xiàn)陽性細(xì)胞。各組ALP 含量隨時(shí)間延長均逐漸增高，其中B 組各時(shí)間點(diǎn)含量均最高，與其余各組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01），各時(shí)間點(diǎn)A、C 組與D、E 組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01），A、C 組間及D、E 組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。各組OC 含量隨時(shí)間延長逐漸增高，培養(yǎng)第7、14 天時(shí)B 組含量最高，各時(shí)間點(diǎn)B 組與其余各組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01），第4、14 天時(shí)C、D 組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01），第14 天時(shí)A、C 組和E 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05），其余各時(shí)間點(diǎn)各組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論 大鼠臍血來源的VECs 能在體外誘導(dǎo)ADSCs 向成骨細(xì)胞方向分化，1 ∶ 1 比例分化能力最強(qiáng)。
引用本文： 王?？?劉流,趙德萍,何曉光,代曉明,李逸松,李玉曉. 體外血管內(nèi)皮細(xì)胞和脂肪干細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)對(duì)脂肪干細(xì)胞成骨分化的影響. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2010, 24(4): 399-405. doi: 復(fù)制