• 四川大學(xué)華西醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科(成都,610041);

目的 為提高BMSCs 的靜脈移植效率,研究單核細(xì)胞趨化蛋白1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)對經(jīng)成肌誘導(dǎo)分化后的小鼠BMSCs 的體外趨化遷移作用。 方法 以差速貼壁法與密度梯度離心法相結(jié)合分離培養(yǎng)C57/BL10 小鼠BMSCs,并采用ALP Gomori 改良鈣鈷法染色行成骨誘導(dǎo)鑒定。取第3 代BMSCs 以5 氮雜胞苷(5-azacytidine,5-Aza)為誘導(dǎo)劑進(jìn)行成肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化。以不同濃度(25、50、100、200、400 ng/mL)的MCP-1 對經(jīng)成肌誘導(dǎo)分化后的小鼠BMSCs 進(jìn)行體外趨化遷移,計(jì)數(shù)遷移細(xì)胞數(shù),以單純L-DMEM 培養(yǎng)基為對照;應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測經(jīng)成肌誘導(dǎo)分化后的小鼠BMSCs 的C-C 趨化因子受體(chemokine receptor 2,CKR-2)的表達(dá)。 結(jié)果 第3 代細(xì)胞能誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞,提示所用細(xì)胞為BMSCs。經(jīng)成肌誘導(dǎo)分化后的BMSCs 可形成肌小管結(jié)構(gòu)。MCP-1 濃度為25、50、100、200、400 ng/mL 時(shí),遷移至Millicell 小室聚碳酸酯膜外層的細(xì)胞數(shù)分別為(35.066 7 ± 6.584 2)、(43.200 0 ± 6.460 8)、(44.466 7 ± 4.823 5)、(45.600 0 ± 8.650 3)、(50.733 3 ± 7.582 5)個(gè),與對照組(28.333 3 ± 8.917 6)個(gè)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  lt; 0.05),25、50、400 ng/mL 組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  lt; 0.05)。流式細(xì)胞儀檢測顯示,加入一抗和二抗的待測樣本CKR-2 表達(dá)率為48.0%,與空白對照(0.6%)和僅加入二抗的陰性對照(17.0%)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  lt; 0.001)。 結(jié)論 MCP-1 對經(jīng)成肌誘導(dǎo)分化后的小鼠BMSCs 有趨化遷移作用,MCP-1/CKR-2 通路參與了小鼠BMSCs 的遷移。

引用本文: 劉舉,周紅雨,劉立斌,羅麗,連志云,李慧英. 單核細(xì)胞趨化蛋白1 體外趨化經(jīng)成肌誘導(dǎo)分化后的小鼠BMSCs 實(shí)驗(yàn)研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2010, 24(7): 834-837. doi: 復(fù)制