• 1 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院骨科(重慶,400010);;
  • 2 第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院創(chuàng)傷中心;

目的 不同強度和持續(xù)時間下FGF 信號的生物效應(yīng)可能不同,探討FGF 信號持續(xù)增強對體外培養(yǎng)小鼠骺板生長的影響及可能機制。 方法 取胚胎期15 d 的C57BL/6J 小鼠掌骨建立體外培養(yǎng)模型,分為3 組(各40 只掌骨)。對照組加入0.1% DMSO,bFGF 組加入100 μg/L bFGF 和0.1% DMSO,PD98059 組加入100 μg/L bFGF 和50μmol/ L PD98059(含0.1% DMSO)。培養(yǎng)6 d 后用Calcein 溶液對掌骨的鈣化組織染色,測量其總長度(total length,TL)和鈣化組織長度(ossified tissue length,OSL)的增加百分率。培養(yǎng)7 d 提取骺板軟骨細胞的RNA,實時熒光定量PCR 儀檢測Ⅱ型膠原(collagen type Ⅱ,Col Ⅱ)、Col Ⅹ、Ihh(Indian hedgehog)基因表達的變化。 結(jié) 果 胚胎小鼠的掌骨在體外培養(yǎng)條件下繼續(xù)生長發(fā)育。培養(yǎng)6 d 后,bFGF 組掌骨TL 增加百分率與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P  gt; 0.05),OSL增加百分率顯著小于對照組(P  lt; 0.05);PD98059 組掌骨TL 增加百分率和OSL 增加百分率與對照組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P  gt; 0.05),但均較bFGF 組顯著提高(P  lt; 0.05)。培養(yǎng)7 d,bFGF 組Ihh、Col Ⅱ和Col Ⅹ基因表達的相對含量均較對照組顯著降低(P  lt; 0.05);PD98059 組Col Ⅱ和Col Ⅹ基因表達的相對含量與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P  gt; 0.05),但顯著高于bFGF 組(P  lt; 0.05),Ihh 基因表達的相對含量均顯著高于對照組和bFGF 組(P  lt; 0.05)。 結(jié)論 持續(xù)的FGF 信號增強可能通過Ihh 下調(diào)來影響Col Ⅱ和Col Ⅹ表達,使體外培養(yǎng)的骺板生長遲滯。細胞外信號調(diào)節(jié)激酶信號通路可能在上述機制中發(fā)揮重要作用。

引用本文: 尹良軍,沈岳,鄧忠良,盧先紅,晏錚劍,聶茂,陳林. FGF信號持續(xù)增強對體外培養(yǎng)小鼠骺板的影響. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2010, 24(8): 953-957. doi: 復(fù)制