目的 前交叉韌帶（anterior cruciate ligament，ACL）重建術(shù)腱- 骨愈合情況是手術(shù)成敗的關(guān)鍵因素。將不同濃度富血小板血漿（platelet-rich plasma，PRP）/ 異種小牛脫蛋白骨（deproteinized bone，DPB）凝膠復(fù)合物作為骨隧道填充物，觀察ACL 重建后腱- 骨愈合的組織學(xué)變化，探討該復(fù)合物對(duì)腱- 骨愈合的促進(jìn)作用，并確定PRP 的最佳濃度。 方法 取新西蘭大白兔耳中央動(dòng)脈血8 mL，采用Landesberg 方法制備PRP，并將上清液作為稀釋劑，制備濃度分別為30%、60%、100% 的PRP。取新鮮新生小牛股骨骺端松質(zhì)骨，經(jīng)30% H2O2、乙醚交替浸泡24 h，連續(xù)6 次，制備DPB。將DPB 浸泡于不同濃度PRP 中并加入激活劑制備PRP/DPB 凝膠復(fù)合物。取54 只8 ～ 12 月齡新西蘭大白兔，體重（2.5 ± 0.4）kg，隨機(jī)分成3 組（n=18），分別為30%PRP/DPB 凝膠復(fù)合物組（A 組）、60%PRP/DPB 凝膠復(fù)合物組（B 組）、100%PRP/DPB 凝膠復(fù)合物組（C 組）。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物制備雙側(cè)ACL 缺損模型。隨機(jī)取一側(cè)下肢以對(duì)應(yīng)濃度的PRP/DPB 凝膠復(fù)合物作為骨隧道填充物，以自體半腱肌肌腱重建ACL，作為實(shí)驗(yàn)側(cè)；另一側(cè)行自體半腱肌肌腱重建ACL，作為對(duì)照側(cè)。術(shù)后觀察各組動(dòng)物一般情況，于術(shù)后3、6、12 周取材行大體觀察及HE 染色，光鏡下觀察腱- 骨愈合情況，并參照Demirag等標(biāo)準(zhǔn)對(duì)腱- 骨界面愈合情況進(jìn)行Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級(jí)半定量評(píng)價(jià)。 結(jié)果 大體觀察：術(shù)后3 周各組關(guān)節(jié)滑液稍增多，股骨隧道內(nèi)未見(jiàn)骨樣組織；6 周時(shí)各組無(wú)關(guān)節(jié)積液，隧道內(nèi)口見(jiàn)瘢痕組織增生；12 周時(shí)各組移植肌腱與骨隧道壁纖維組織連接致密。組織學(xué)觀察：A 組實(shí)驗(yàn)側(cè)術(shù)后3 周，腱- 骨界面間形成新生肉芽組織界面；6 周時(shí)腱- 骨界面間出現(xiàn)寬度不一的Sharpey 樣纖維；12 周時(shí)腱- 骨界面Sharpey 樣纖維排列有序，形成不規(guī)則、模糊的“潮線”。B 組實(shí)驗(yàn)側(cè)在各時(shí)間點(diǎn)腱-骨界面膠原纖維連接均優(yōu)于其他各組；術(shù)后3 周腱- 骨界面發(fā)現(xiàn)排列較規(guī)整的類(lèi)軟骨細(xì)胞；6 周時(shí)腱- 骨界面骨隧道類(lèi)軟骨細(xì)胞單位面積數(shù)量明顯多于其他組；12 周時(shí)腱- 骨界面可見(jiàn)移植物類(lèi)軟骨細(xì)胞增生，分化成熟，Sharpey 樣纖維連接致密有序。C 組實(shí)驗(yàn)側(cè)3 周時(shí)腱- 骨界面膠原纖維連接與A 組實(shí)驗(yàn)側(cè)及對(duì)照側(cè)相似，6、12 周相對(duì)成熟的致密結(jié)締組織分化較差。參照Demirag 等標(biāo)準(zhǔn)對(duì)腱- 骨界面愈合進(jìn)行分級(jí)，術(shù)后3、6 周B 組實(shí)驗(yàn)側(cè)和對(duì)照側(cè)、術(shù)后12 周B 組實(shí)驗(yàn)側(cè)與C組實(shí)驗(yàn)側(cè)，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P  lt; 0.05）；其余各組實(shí)驗(yàn)側(cè)之間以及同組實(shí)驗(yàn)側(cè)與對(duì)照側(cè)比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P  gt; 0.05）。 結(jié)論 PRP 濃度為60% 時(shí)，其與DPB 的復(fù)合物形成凝膠后具有良好的生物相容性和骨誘導(dǎo)作用，可提高兔ACL 重建術(shù)后腱- 骨愈合。

引用本文： 趙耀,翟文亮. 富血小板血漿復(fù)合小牛脫蛋白骨重建前交叉韌帶腱- 骨愈合的組織學(xué)觀察. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2010, 24(11): 1323-1329. doi: 復(fù)制