目的 探討hVEGF165 及hBMP-7 共表達重組腺相關病毒（recombinant adeno-associated virus，rAAV）體內誘導成骨及成血管的活性，為股骨頭缺血性壞死（avascular necrosis of the femoral head，ANFH）的AAV 基因治療提供理論基礎。 方法 取體外培養(yǎng)的第3 代兔BMSCs，分別采用以下4 種病毒轉染并分為4 組：rAAV-hVEGF165- 內部核糖體進入位點序列（internal ribosome entry site，IRES）-hBMP-7（A 組）、rAAV-hVEGF165- 綠色熒光蛋白（green fluorescent protein，GFP）（B 組）、rAAV- hBMP-7-GFP（C 組）及rAAV-IRES-GFP（D 組）。取24 只雄性新西蘭大耳白兔制作后肢缺血模型，并隨機分為4 組（n=6），于股骨肌肉內植入上述4 組病毒轉染的BMSCs，8 周后應用超聲影像學檢測兔后肢脛前動脈血流量，行CD34 免疫組織化學染色檢測微血管生成。另取24 只雄性新西蘭大耳白兔制作股骨肌袋模型，并隨機分為4 組（n=6），于肌袋內植入上述4 組病毒轉染的BMSCs，8 周后應用X 線片檢測兔后肢原位骨化，行von Kossa 鈣鹽染色檢測肌肉組織成骨礦化。 結果 病毒注射后動物未出現(xiàn)局部或全身毒性反應。病毒注射后8 周，A 組兔后肢脛前動脈血流百分比及CD34 陽性微血管數(shù)均高于其他3 組，差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）；B 組高于C、D 組，差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）；C、D 組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）。病毒注射后8 周，A、C 組兔后肢肌袋內出現(xiàn)可被X 線檢測到的原位骨化，von Kossa 肌肉組織鈣鹽染色可見大量鈣鹽沉積，且A 組原位骨化及鈣鹽沉積程度均較C 組強；B 組及D 組均未見明顯原位骨化及鈣鹽沉積形成。 結論 rAAV-hVEGF165-IRES-hBMP-7 載體具有體內誘導成骨及成血管的生物學活性。
引用本文： 張晨,馬乾鵬,強輝,李苗,黨曉謙,王坤正. hVEGF165 及hBMP-7 共表達重組腺相關病毒載體體內誘導成骨及成血管研究. 中國修復重建外科雜志, 2010, 24(12): 1449-1445. doi: 復制