目的 探討瘦素（leptin，LEP）對(duì) hBMSCs 成骨分化的作用及機(jī)制。 方法 采用全骨髓法培養(yǎng)hBMSCs，取第3 代hBMSCs 分為A、B、C、D、E、F 組，待細(xì)胞貼壁后各組分別加入400、200、100、50 ng/mL LEP 、100 ng/ mL BMP 和普通培養(yǎng)基2 mL 進(jìn)行培養(yǎng)。于培養(yǎng)后7 d 行ALP 染色、21 d 行礦化結(jié)節(jié)染色，倒置相差顯微鏡觀察染色結(jié)果；并于培養(yǎng)后7、14、21 d，檢測(cè)各組ALP 活性、骨鈣素（osteocalcin，OCN）水平，篩選 LEP 的最佳誘導(dǎo)濃度；B、E、F 組細(xì)胞培養(yǎng)7 d 后，采用 RT-PCR 檢測(cè)成骨相關(guān)基因：核心結(jié)合因子（core-binding factor α1，Cbfα1）、ALP、Col Ⅰ、OCN mRNA 的表達(dá)。 結(jié)果 誘導(dǎo)培養(yǎng)7 d，ALP 染色結(jié)果顯示，A、B、C、D、E 組細(xì)胞胞漿均呈藍(lán)色陽(yáng)性著色，F(xiàn) 組呈弱陽(yáng)性；誘導(dǎo)培養(yǎng)21 d，礦化結(jié)節(jié)染色結(jié)果顯示，A、B、C、D、E 組細(xì)胞染色呈陽(yáng)性，F(xiàn) 組呈陰性。B 組培養(yǎng)后7、14、21 d，ALP、OCN 活性低于 E 組，但顯著高于其余各組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05），200 ng/mL LEP 為最佳濃度。B、E、F組細(xì)胞培養(yǎng)7 d，F(xiàn) 組Cbfα1、ALP、Col Ⅰ、OCN mRNA 均不表達(dá)；B、E 組各產(chǎn)物mRNA 均有表達(dá)，但B 組低于E 組。 結(jié)論 LEP 可促進(jìn) hBMSCs 成骨分化，其機(jī)制可能為L(zhǎng)EP 促進(jìn)了成骨相關(guān)基因的表達(dá)
引用本文： 徐俊昌,吳濤,鐘招明,趙成毅,湯勇智,陳建庭. 瘦素對(duì)hBMSCs 成骨分化的作用及機(jī)制研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(2): 140-144. doi: 復(fù)制
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