目的 探討兔BMSCs- 殼聚糖凝膠復(fù)合體移植治療椎間盤髓核缺損退變的效果，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 6 只健康1 月齡新西蘭白兔，雌雄不限，體重1.0 ～ 1.5 kg。取骨髓2 mL，分離培養(yǎng)BMSCs。取第3代BMSCs，5-BrdU 活細(xì)胞示蹤劑標(biāo)記，與殼聚糖凝膠混勻，制備BMSCs- 殼聚糖凝膠復(fù)合體。將6 只動(dòng)物建立兔椎間盤髓核缺損退變模型，并隨機(jī)分為3 組（n=2）：正常對(duì)照組僅分離暴露椎間盤，不作任何處理；移植治療組將30 μL 自體BMSCs- 殼聚糖凝膠復(fù)合體注射入缺損椎間盤中心；缺損退變組僅注射入0.01 mol/L PBS 液30 μL。移植后4 周處死動(dòng)物，取出移植修復(fù)的椎間盤，行細(xì)胞5-BrdU 標(biāo)記檢測(cè)、HE、aggrecan 番紅O 染色及Col Ⅱ免疫組織化學(xué)染色；Col Ⅱ免疫組織化學(xué)染色切片行灰度值測(cè)定。 結(jié)果 細(xì)胞標(biāo)記檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，自體BMSCs 移植后繼續(xù)存活并增殖，形成細(xì)胞克隆。正常對(duì)照組及移植組椎間盤HE 染色示椎間盤結(jié)構(gòu)清晰，髓核組織及外周纖維環(huán)分界清晰，細(xì)胞核及細(xì)胞漿染色明顯；缺損退變組示椎間盤結(jié)構(gòu)紊亂，髓核組織和外周纖維化分界不清。aggrecan 番紅O 染色示正常對(duì)照組及移植治療組椎間盤染色明顯，椎間盤結(jié)構(gòu)清晰；缺損退變組椎間盤結(jié)構(gòu)紊亂，髓核組織和外周纖維化分界不清。Col Ⅱ免疫組織化學(xué)染色示正常對(duì)照組以中央髓核組織染色為主，呈黃褐色陽(yáng)性反應(yīng)，椎間盤結(jié)構(gòu)清晰；移植治療組中央髓核組織呈陽(yáng)性反應(yīng)，細(xì)胞間質(zhì)可見明顯黃褐色，大體結(jié)構(gòu)仍保持完整；缺損退變組染色較前兩組淺，且結(jié)構(gòu)不清。3 組Col Ⅱ免疫組織化學(xué)染色切片行灰度值測(cè)定，正常對(duì)照組為223.84 ± 3.93，與移植治療組（221.03 ± 3.53）比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05），但兩組與缺損退變組（172.50 ± 3.13）比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 兔BMSCs- 殼聚糖凝膠復(fù)合體可修復(fù)椎間盤缺損退變，為臨床應(yīng)用可注射式組織工程髓核移植治療椎間盤退變奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
引用本文： 劉杰,王建,周躍. BMSCs- 殼聚糖凝膠復(fù)合體移植治療椎間盤退變的實(shí)驗(yàn)研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(2): 178-182. doi: 復(fù)制