• 四川大學華西醫(yī)院 生物治療國家重點實驗室? 干細胞與組織工程研究室(成都,610041);

目的 探討上皮細胞條件培養(yǎng)液(epithelial cell conditioned medium,ECCM)體外誘導犬BMSCs 向上皮細胞分化的可行性。 方法 成年健康雄性比格犬1 只,體重10 kg。于犬髂后上棘采用骨髓穿刺法取骨髓5 mL,分離培養(yǎng)BMSCs。取犬口腔黏膜下組織,剪成約 4 mm × 4 mm 大小,制備ECCM。取第2 代BMSCs 以2 × 104 個/ 孔細胞密度接種,實驗組于ECCM 中培養(yǎng),對照組于低糖DMEM 完全培養(yǎng)基中培養(yǎng)。觀察兩組細胞形態(tài)特征,MTT 法繪制生長曲線,誘導培養(yǎng)21 d 免疫組織化學染色鑒定上皮細胞特異性標志物——細胞角蛋白19(cytokeratin19,CK-19)和細胞角蛋白AE1/AE3,透射電鏡觀察細胞超微結構。 結果 倒置相差顯微鏡下見兩組細胞均呈長梭形,均勻分布,折光性較強,增殖迅速。兩組細胞生長曲線均呈“S”形,實驗組生長曲線較對照組右移,提示ECCM 對細胞增殖有抑制作用。實驗組CK-19 和細胞角蛋白AE1/AE3 免疫組織化學染色均呈陽性反應,對照組呈陰性。透射電鏡下實驗組細胞胞漿內可見緊密連接。 結論 ECCM 體外有誘導同種BMSCs 向上皮細胞分化的作用。

引用本文: 楊朋,魏人前,譚波,李秀群,王佳,周昆鵬,左瀟,李順,解慧琪. 上皮細胞條件培養(yǎng)液對BMSCs 分化的影響. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(5): 612-616. doi: 復制