觀察TGF-β1 中和抗體對(duì)TGF-β 誘導(dǎo)的肌腱細(xì)胞膠原產(chǎn)生及術(shù)后粘連形成的影響,探討生物學(xué)調(diào)節(jié)在肌腱粘連防治中的作用。 方法 取6 只成年新西蘭大白兔12 條屈趾肌腱分離肌腱成纖維細(xì)胞、腱外膜細(xì)胞和腱內(nèi)膜細(xì)胞,將細(xì)胞隨機(jī)分成2 組,實(shí)驗(yàn)組加入1 ng/mL TGF-β 后,再加入不同濃度TGF-β1 中和抗體,對(duì)照組不添加任何試劑,培養(yǎng)3 d 后ELISA 測(cè)定Col Ⅰ的產(chǎn)生。取84 只兔行中趾屈趾肌腱切斷吻合術(shù),隨機(jī)分成3 組,腱鞘內(nèi)分別注入生理鹽水(NS 組,n=36)、1.0 μg/mL TGF-β1 中和抗體(1.0 μg/mL TGF-β1 組,n=36)和2.0 μg/mL TGF-β1 中和抗體(2.0 μg/mLTGF-β1 組,n=12)。術(shù)后4、8 周取出肌腱行肌腱粘連檢測(cè)、生物力學(xué)測(cè)定、組織學(xué)觀察和掃描電鏡觀察。1、2、4、8 周后取出NS 組及1.0 μg/mL TGF-β1 組肌腱,原位雜交方法測(cè)定TGF-β1 和Col Ⅰ mRNA 的表達(dá)。 結(jié)果 ELISA 檢測(cè)顯示,TGF-β1 能明顯提高肌腱細(xì)胞Col Ⅰ的產(chǎn)生;TGF-β1 抗體能降低肌腱成纖維細(xì)胞、腱外膜細(xì)胞和腱內(nèi)膜細(xì)胞Col Ⅰ的產(chǎn)生,且呈劑量依賴關(guān)系。術(shù)后4、8 周,NS 組屈趾肌腱滑動(dòng)距離較短,模擬主動(dòng)屈曲度明顯受限,與1.0 μg/mL TGF-β1 組和2.0 μg/ mL TGF-β1 組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05);最大抗斷裂載荷各組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。掃描電鏡和組織學(xué)觀察結(jié)果顯示,術(shù)后4、8 周NS 組膠原纖維排列紊亂,1.0 μg/mL TGF-β1 組和2.0 μg/mL TGF-β1 組膠原纖維排列整齊。原位雜交結(jié)果顯示,術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)1.0 μg/mL TGF-β1 組TGF-β1 mRNA和Col ⅠmRNA表達(dá)水平均低于NS組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。 結(jié)論 TGF-β1 中和抗體能有效抑制TGF-β1 在肌腱損傷修復(fù)中的作用,減少粘連形成。
引用本文: 夏長(zhǎng)所,楊選影,韓迎秋,孫康,洪光祥. TGF-β1 中和抗體對(duì)TGF-β 誘導(dǎo)的肌腱膠原產(chǎn)生和術(shù)后粘連形成的影響. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(6): 698-703. doi: 復(fù)制
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