探討自體PRP 對體外培養(yǎng)人脂肪來源干細(xì)胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）增殖及成骨分化的影響。 方法 取自愿捐獻(xiàn)吸脂術(shù)獲取的脂肪組織進(jìn)行分離培養(yǎng)ADSCs，倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。將第3 代ADSCs 分別行成脂、成軟骨定向誘導(dǎo)培養(yǎng)鑒定，并行CD29 及CD44 免疫熒光染色觀察。取第3 代ADSCs 分別采用含10 mL/L PRP 的成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基（PRP 組）和不含PRP 的成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基（對照組）進(jìn)行培養(yǎng)，倒置顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，培養(yǎng)后1、2、3、4、5 d 采用MTT 法檢測細(xì)胞增殖活性；7、14、21、28 d 行ALP 活性檢測，另取培養(yǎng)7、14 d 的PRP組細(xì)胞行ALP 染色觀察；14 d 時行PRP 組茜素紅染色檢測鈣結(jié)節(jié)形成情況。 結(jié)果 倒置顯微鏡下第3 代ADSCs 多為梭形，倍增時間約35 h。成脂及成軟骨誘導(dǎo)鑒定均為陽性，免疫熒光染色CD29 和CD44 呈陽性。MTT 法示PRP 組1、2、3、4、5 d 的吸光度值分別為0.137 ± 0.015、0.219 ± 0.023、0.367 ± 0.031、0.586 ± 0.039、0.948 ± 0.046，對照組分別為0.081 ±0.009、0.115 ± 0.012、0.162 ± 0.017、0.242 ± 0.025、0.356 ± 0.032，兩組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.01）。成骨誘導(dǎo)7 d后，PRP 組ALP 染色陽性，細(xì)胞胞漿呈灰黑色，可見黑色沉淀；14 d 后陽性細(xì)胞增多。ALP 活性檢測示PRP 組7、14、21、28 d 細(xì)胞活性值分別為23.96 ± 2.05、41.26 ± 3.38、38.12 ± 3.03、35.89 ± 2.24，對照組分別為17.83 ± 1.62、26.64 ± 2.37、
23.85 ± 1.99、20.78 ± 1.81，兩組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.01）。成骨誘導(dǎo)14 d 后，茜素紅染色示PRP 組鈣結(jié)節(jié)形成。 結(jié)論 體外培養(yǎng)時，自體PRP 可促進(jìn)人ADSCs 的增殖并誘導(dǎo)成骨分化，為骨組織工程提供一種新的種子細(xì)胞來源。
引用本文： 黎洪棉,柳大烈,余元龍,吳濤. 自體PRP 促進(jìn)人脂肪來源干細(xì)胞成骨分化的體外實驗研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(6): 732-736. doi: 復(fù)制