目的 構(gòu)建攜帶NGF 基因序列的5 型腺病毒（adenovirus expressing NGF，Ad-NGF），探討其在促進(jìn)大鼠坐骨神經(jīng)神修復(fù)與再生中的作用。 方法 將NGF 基因序列克隆至5 型腺病毒穿梭質(zhì)粒pCA13，并在HEK-293 細(xì)胞中包裝得到重組腺病毒Ad-NGF 并測(cè)序鑒定。雄性SD 大鼠32 只，體重180 ～ 200 g，隨機(jī)分為4 組（n=8）。切斷大鼠右側(cè)坐骨神經(jīng)并縫合，建立坐骨神經(jīng)損傷模型。模型制備后，A 組及C 組分別于術(shù)側(cè)腓腸肌注射Ad-NGF 及不攜帶NGF基因序列的空腺病毒載體，1 × 108 PFU/ 次，隔天1 次，共3 次； B 組及D 組分別于術(shù)側(cè)腓腸肌注射NGF（200 U/d）及生理鹽水（100 μL/d），連續(xù)3 周。術(shù)后第31 天檢測(cè)坐骨神經(jīng)功能指數(shù)、神經(jīng)電生理檢測(cè)，取吻合處及其遠(yuǎn)端1 cm 坐骨神經(jīng)，采用RT-PCR 及Western blot 技術(shù)定量檢測(cè)大鼠損傷坐骨神經(jīng)中NGF mRNA 及蛋白的表達(dá)水平，并行組織學(xué)及免疫組織化學(xué)、透射電鏡觀察。 結(jié)果 實(shí)驗(yàn)成功構(gòu)建了攜帶NGF 基因序列的5 型腺病毒Ad-NGF。A 組坐骨神經(jīng)功能指數(shù)、神經(jīng)傳導(dǎo)速度、誘發(fā)電位波幅及潛伏期與B、C、D 組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；B、C、D 組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。RT-PCR 及Western blot 檢測(cè)顯示，A 組NGF mRNA 及蛋白表達(dá)量與B、C、D 組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；B、C、D 組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。組織學(xué)及免疫組織化學(xué)觀察示A 組坐骨神經(jīng)再生情況明顯優(yōu)于其他組。透射電鏡觀察示A 組坐骨神經(jīng)橫切面軸突直徑、髓鞘厚度、神經(jīng)纖維個(gè)數(shù)與B、C、D 組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；B、C、D 組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論 Ad-NGF 提供了一種在周圍神經(jīng)損傷局部獲得大量NGF 的新方法，且可有效促進(jìn)大鼠坐骨神經(jīng)損傷后的修復(fù)。
引用本文： 陳渝,王大勇,王祖貴,翁政,鄧忠良. 攜帶NGF 基因腺病毒治療大鼠坐骨神經(jīng)損傷的實(shí)驗(yàn)研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(8): 947-953. doi: 復(fù)制