• 1 第二軍醫(yī)大學(xué)長征醫(yī)院整形外科(上海,200003),2 生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室,3 生理學(xué)教研室;;
  • 4 第二軍醫(yī)大學(xué)長海醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室;

目的 觀察肌肉游離移植后泛素連接酶(MAFbx)mRNA 和蛋白表達(dá)的變化,以及肌肉萎縮和肌肉功能的動態(tài)恢復(fù)情況,并探討三者之間的關(guān)系。 方法 雌性SPF 級SD 大鼠36 只,體重(250 ± 25)g。隨機(jī)選取一側(cè)行股薄肌原位游離移植手術(shù),作為實(shí)驗(yàn)側(cè);另一側(cè)不行手術(shù)作為對照側(cè)。術(shù)后觀察大鼠一般情況,于術(shù)后1、2、4、10、15 和30周,分別取6 只大鼠測量實(shí)驗(yàn)側(cè)和對照側(cè)股薄肌肌肉收縮能力、肌濕重維持率,HE 染色觀察肌纖維橫截面積,實(shí)時(shí)定量PCR 檢測MAFbx/Atrogin-1 mRNA 相對表達(dá)量,Western blot 檢測MAFbx 蛋白表達(dá)。 結(jié)果 36 只大鼠全部成活,切口愈合好,實(shí)驗(yàn)側(cè)肢體功能無障礙。實(shí)驗(yàn)側(cè)肌纖維橫截面積、肌肉濕重維持率、肌肉最大單收縮力維持率和肌肉強(qiáng)直收縮力維持率均呈先降低(術(shù)后1 ~ 4 周)后增加(術(shù)后4 ~ 30 周)的趨勢。MAFbx mRNA 相對表達(dá)量術(shù)后2 周最高,為對照側(cè)7 倍;術(shù)后15 ~ 30 周逐漸下降,為對照側(cè)1.1 ~ 1.5 倍;各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)側(cè)與對照側(cè)比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  lt; 0.05)。Western blot 檢測結(jié)果顯示術(shù)后1 ~ 15 周,實(shí)驗(yàn)側(cè)肌肉內(nèi)MAFbx 蛋白相對表達(dá)量與對照側(cè)相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  lt; 0.05);術(shù)后30 周差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05)。肌濕重維持率、肌纖維橫截面積恢復(fù)率分別與最大單收縮力維持率和最大強(qiáng)直收縮力維持率的相關(guān)系數(shù)為0.95、0.75 和0.93、0.68(P  lt; 0.05)。MAFbx mRNA 及蛋白相對表達(dá)量分別與肌肉濕重維持率、肌纖維橫截面積恢復(fù)率、最大單收縮力維持率、最大強(qiáng)直收縮力維持率的相關(guān)系數(shù)為— 0.62(P  lt; 0.05)、— 0.45(P  gt; 0.05)、— 0.72(P  lt; 0.05)、— 0.78(P  lt; 0.05)和— 0.95(P  lt; 0.05)、— 0.82(P  lt; 0.05)、— 0.89(P  lt; 0.05)、— 0.54(P  gt; 0.05)。 結(jié)論 移植肌肉功能降低與肌肉萎縮密切相關(guān)。MAFbx mRNA 和蛋白表達(dá)增高,尤其在獲得神經(jīng)支配后4 ~ 15周仍持續(xù)升高,可能是肌肉萎縮引起肌肉功能降低的一個(gè)聯(lián)系點(diǎn)。

引用本文: 劉安堂,于大志,張盈帆,朱鴷,陳歡,任安經(jīng),方超平,蔡在龍,江華. 肌肉游離移植后MAFbx 表達(dá)及肌肉功能實(shí)驗(yàn)研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(8): 969-973. doi: 復(fù)制