目的 研究利用海藻酸鈉水凝膠和SIS 復(fù)合作為支架材料，接種軟骨細(xì)胞構(gòu)建組織工程軟骨修復(fù)兔全層關(guān)節(jié)軟骨缺損的效果。 方法 采用機(jī)械法和去垢劑- 酶消化法制備SIS。取8 只2 ～ 3 周齡新西蘭白兔，肱骨頭和股骨髁負(fù)重面全層關(guān)節(jié)軟骨，體外培養(yǎng)軟骨細(xì)胞。將常規(guī)擴(kuò)增培養(yǎng)的第4 代軟骨細(xì)胞用海藻酸鈉稀釋，軟骨細(xì)胞濃度為（5 ～ 7）× 107 個/mL，均勻涂刷于SIS 表面，制備軟骨細(xì)胞- 海藻酸鈉水凝膠-SIS 復(fù)合體。取6 月齡清潔級新西蘭白兔40 只，體重3.0 ～ 3.5 kg，根據(jù)處理方法不同隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組（n=20），建立單側(cè)膝關(guān)節(jié)4 mm × 4 mm 全層軟骨缺損模型（左右不限）。實(shí)驗(yàn)組將復(fù)合體通過逐層疊加法置于缺損處，構(gòu)建組織工程軟骨，表面縫合覆蓋一層SIS 薄膜將缺損完全填充；對照組以單純海藻酸鈉水凝膠填充軟骨缺損、覆蓋SIS 薄膜縫合。術(shù)后觀察動物一般情況，于術(shù)后1、3、5、7、9 個月，各組分別處死動物，行大體和組織學(xué)觀察。 結(jié)果 由于麻醉死亡、切口感染和腹瀉死亡，8 只動物被排除實(shí)驗(yàn)，兩組分別余16 只動物進(jìn)行取材觀察。術(shù)后1、3、5、7、9 個月，每組分別隨機(jī)處死3、3、3、3、4 只動物。大體觀察和組織學(xué)Masson染色結(jié)果顯示：實(shí)驗(yàn)組術(shù)后1 個月，植入體表面的SIS 與宿主軟骨組織融合，邊界消失；3 個月，植入體部分軟骨化，界面融合；5 個月，植入體演變?yōu)槔w維軟骨；7 個月植入體內(nèi)軟骨組織中纖維排列接近宿主軟骨；9 個月植入體內(nèi)軟骨纖維排列紊亂，細(xì)胞代謝增生活躍。對照組觀察9 個月內(nèi)缺損無明顯修復(fù)。組織學(xué)染色結(jié)果經(jīng)圖像量化分析顯示，實(shí)驗(yàn)組各時間點(diǎn)缺損內(nèi)修復(fù)組織單位面積染色強(qiáng)度均較對照組顯著升高（P lt; 0.05）；術(shù)后3、5、7 個月，實(shí)驗(yàn)組軟骨化程度逐漸增大（P lt; 0.05），9 個月較7 個月有所降低（P lt; 0.05）。 結(jié)論 利用軟骨細(xì)胞- 海藻酸鈉水凝膠-SIS 復(fù)合體表層縫合SIS 薄膜術(shù)構(gòu)建的組織工程軟骨原位修復(fù)兔軟骨缺損，能促進(jìn)軟骨組織再生，符合關(guān)節(jié)軟骨的生理性修復(fù)過程。
引用本文： 莫湘濤,鄧力,李秀群,解慧琪,羅靜聰,郭尚春,楊志明. 軟骨細(xì)胞- 海藻酸鈉水凝膠-SIS 復(fù)合體修復(fù)全層關(guān)節(jié)軟骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(8): 974-979. doi: 復(fù)制