目的 研究利用海藻酸鈉水凝膠和SIS 復合作為支架材料,接種軟骨細胞構建組織工程軟骨修復兔全層關節(jié)軟骨缺損的效果。 方法 采用機械法和去垢劑- 酶消化法制備SIS。取8 只2 ~ 3 周齡新西蘭白兔,肱骨頭和股骨髁負重面全層關節(jié)軟骨,體外培養(yǎng)軟骨細胞。將常規(guī)擴增培養(yǎng)的第4 代軟骨細胞用海藻酸鈉稀釋,軟骨細胞濃度為(5 ~ 7)× 107 個/mL,均勻涂刷于SIS 表面,制備軟骨細胞- 海藻酸鈉水凝膠-SIS 復合體。取6 月齡清潔級新西蘭白兔40 只,體重3.0 ~ 3.5 kg,根據(jù)處理方法不同隨機分為實驗組和對照組(n=20),建立單側膝關節(jié)4 mm × 4 mm 全層軟骨缺損模型(左右不限)。實驗組將復合體通過逐層疊加法置于缺損處,構建組織工程軟骨,表面縫合覆蓋一層SIS 薄膜將缺損完全填充;對照組以單純海藻酸鈉水凝膠填充軟骨缺損、覆蓋SIS 薄膜縫合。術后觀察動物一般情況,于術后1、3、5、7、9 個月,各組分別處死動物,行大體和組織學觀察。 結果 由于麻醉死亡、切口感染和腹瀉死亡,8 只動物被排除實驗,兩組分別余16 只動物進行取材觀察。術后1、3、5、7、9 個月,每組分別隨機處死3、3、3、3、4 只動物。大體觀察和組織學Masson染色結果顯示:實驗組術后1 個月,植入體表面的SIS 與宿主軟骨組織融合,邊界消失;3 個月,植入體部分軟骨化,界面融合;5 個月,植入體演變?yōu)槔w維軟骨;7 個月植入體內軟骨組織中纖維排列接近宿主軟骨;9 個月植入體內軟骨纖維排列紊亂,細胞代謝增生活躍。對照組觀察9 個月內缺損無明顯修復。組織學染色結果經圖像量化分析顯示,實驗組各時間點缺損內修復組織單位面積染色強度均較對照組顯著升高(P lt; 0.05);術后3、5、7 個月,實驗組軟骨化程度逐漸增大(P lt; 0.05),9 個月較7 個月有所降低(P lt; 0.05)。 結論 利用軟骨細胞- 海藻酸鈉水凝膠-SIS 復合體表層縫合SIS 薄膜術構建的組織工程軟骨原位修復兔軟骨缺損,能促進軟骨組織再生,符合關節(jié)軟骨的生理性修復過程。
引用本文: 莫湘濤,鄧力,李秀群,解慧琪,羅靜聰,郭尚春,楊志明. 軟骨細胞- 海藻酸鈉水凝膠-SIS 復合體修復全層關節(jié)軟骨缺損的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(8): 974-979. doi: 復制
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