• 1 四川大學(xué)華西醫(yī)院骨科(成都,610041);;
  • 2 自貢市第四人民醫(yī)院;;
  • 3 四川大學(xué)生命科學(xué)院;

目的 探討PLGA- 絲素- 膠原納米三維多孔支架的制備方法及細(xì)胞相容性。 方法 采用靜電紡絲法制備PLGA- 絲素- 膠原(實驗組)及單純PLGA(對照組)納米三維多孔支架,掃描電鏡觀察兩組支架材料,測定支架纖維直徑、孔隙率、吸水率及抗拉強(qiáng)度。取8 只SD 近交系乳鼠雙側(cè)臂叢神經(jīng)及坐骨神經(jīng),分離培養(yǎng)SC,S-100 免疫組織學(xué)觀察并測定SC 純度。取第4 代SC 以 5 × 104 個/mL 分別與25%、50% 及100% 濃度的兩組支架浸提液進(jìn)行培養(yǎng),以DMEM 培養(yǎng)作空白對照組。培養(yǎng)1、3、5、7 d 采用MTT 法測定吸光度(A)值。將第4 代SC 以5 × 104 個/mL 密度分別接種至PLGA- 絲素- 膠原(實驗組)和單純PLGA(對照組)納米三維多孔支架支架復(fù)合培養(yǎng)。復(fù)合培養(yǎng)2、4、6 d 行掃描電鏡觀察,另于4 d 行激光掃描共聚焦顯微鏡觀察SC 在材料上生長情況。 結(jié)果 掃描電鏡觀察顯示兩組支架呈相互交聯(lián)的多孔網(wǎng)狀無紡結(jié)構(gòu)。實驗組和對照組纖維直徑分別為(141 ± 9)nm 和(205 ± 11)nm;支架內(nèi)孔洞相互連通,孔隙率分別為87.4% ± 1.1% 和85.3% ± 1.3%;吸水率分別為2 647% ± 172% 和2 593% ± 161%;抗拉強(qiáng)度分別為(0.32 ± 0.03)MPa 和(0.28 ± 0.04)MPa;兩組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P  lt; 0.05)。S-100 免疫組織化學(xué)染色顯示SC 純度為96.5% ±1.3%。MTT 檢測SC 在不同濃度實驗組及空白對照組中生長良好,A 值均隨時間延長而增大,同組各時間點比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P  lt; 0.05);各時間點各濃度實驗組及空白對照組間比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P  gt; 0.05)。掃描電鏡觀察顯示, 實驗組SC 在支架上生長良好,4 d 軸突連接,6 d 后大量增殖,基質(zhì)分泌;生長情況優(yōu)于對照組。復(fù)合培養(yǎng)4 d 激光掃描共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果與掃描電鏡一致。 結(jié)論 采用靜電紡絲方法制備的PLGA- 絲素- 膠原納米三維多孔支架安全無毒,具備合適的孔徑和孔隙率,適合SC 生長,細(xì)胞相容性良好,是一種組織工程神經(jīng)良好的支架載體。

引用本文: 吳剛,董長超,王光林,高偉強(qiáng),范紅松,肖文謙,張利. PLGA- 絲素- 膠原納米三維多孔支架材料的制備及細(xì)胞相容性研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(8): 1007-1011. doi: 復(fù)制