目的 研究神經(jīng)營養(yǎng)因子 3（neurotrophic factor 3，NT-3）基因修飾的SC 對坐骨神經(jīng)缺損后促進神經(jīng)再生的作用。 方法 取3 d 齡Wistar 幼鼠雙側(cè)坐骨神經(jīng)，采用雙酶消化法及貼壁法分離、培養(yǎng)及純化SC。取第3 代SC 進行實驗。采用陽離子脂質(zhì)體將NT-3 質(zhì)粒轉(zhuǎn)入SC，于轉(zhuǎn)染后1、2、4、8 周ELISA 雙抗體夾心法測定NT-3 蛋白的表達；采用DNA 酶切鑒定轉(zhuǎn)染后NT-3 的DNA；免疫組織化學S-100 染色檢測轉(zhuǎn)染色前后SC 純度。分別將3 × 107 個/mLSC、3 × 107 個/mL NT-3 基因修飾SC、NT-3 基因與等體積的ECM 凝膠混合，取20 μL 注入長15.0 mm、內(nèi)徑1.5 mm、壁厚0.3 mm 的PLGA 管，制備神經(jīng)移植復合體。取48 只成年SD 大鼠，雌雄不拘，切除右側(cè)坐骨神經(jīng)10 mm 制備神經(jīng)缺損模型。根據(jù)橋接神經(jīng)缺損的不同神經(jīng)復合體隨機分為4 組（n=12）。A 組：PLGA 管含ECM 凝膠；B 組：PLGA 管含SC及ECM凝膠；C 組：PLGA 管含NT-3 基因及ECM凝膠；D 組：PLGA 管含NT-3 基因修飾SC 和ECM凝膠。術后2、4、6、8、12 周觀察各組大鼠一般情況，術后12 周大體觀察神經(jīng)再生情況，行神經(jīng)電生理檢測、組織學及透射電鏡觀察。 結(jié)果 轉(zhuǎn)染后1、2、4、8 周NT-3 蛋白表達量分別為0.39 ± 0.25、0.76 ± 0.22、1.06 ± 0.38、1.61 ± 0.35，比較差異有統(tǒng)計學意義（P  lt; 0.05）。轉(zhuǎn)染后NT-3 的DNA酶切鑒定結(jié)果與NT-3 基因片段相符。轉(zhuǎn)染前后SC 純度分別為94.7% ± 2.1%及95.6% ± 2.5%，比較差異有統(tǒng)計學意義（P  lt; 0.05）。動物實驗觀察，術后2 周各組大鼠足底開始紅腫、潰瘍；A組潰瘍逐漸加重，無愈合；B、C 組足底潰瘍8 周開始愈合，但12 周仍殘留創(chuàng)面；D 組6 周潰瘍開始愈合，12 周已完全愈合。術后12 周大體觀察A 組再生神經(jīng)蒼白，粗細不均勻，彈性差；B、C 組再生神經(jīng)呈乳白色，質(zhì)韌，彈性可；D 組再生神經(jīng)呈淡紅色，粗細均勻，彈性佳。B、C、D 組肌肉動作電位潛伏期、波幅、運動神經(jīng)傳導速度及再生神經(jīng)軸突數(shù)、髓鞘厚度、神經(jīng)纖維直徑、神經(jīng)組織面積百分比與A 組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P  lt; 0.05）；B、C 組各指標與D 組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P  lt; 0.05）；B、C 組比較， 差異無統(tǒng)計學意義（P  gt; 0.05）。術后12 周透射電鏡觀察示D 組見有髓神經(jīng)髓鞘成熟最好，板層清晰規(guī)則；B、C 組神經(jīng)髓鞘成熟次之；A 組最差。 結(jié)論 NT-3 基因修飾的SC 與PLGA 管構(gòu)建的神經(jīng)移植復合體能促進大鼠坐骨神經(jīng)缺損再生，其再生效果明顯優(yōu)于單純NT-3 基因和SC。

引用本文： 董玉珍,陳振兵,洪光祥. 神經(jīng)營養(yǎng)因子3 基因修飾的SC 促進神經(jīng)再生的研究. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(9): 1104-1109. doi: 復制