目的 探討重組質粒pIRES-hBMP-2-hVEGF165 體外轉染對hBMSCs 成骨誘導分化的影響。 方 法 構建hBMP-2 和hVEGF165 真核共表達載體。取健康成人自愿捐獻的骨髓分離培養(yǎng)hBMSCs，采用陽離子脂質體將構建的質粒pIRES-hBMP-2-hVEGF165、pIRES-hBMP-2、pIRES-hVEGF165 和空質粒載體（pIRES-neo）轉染至hBMSCs，作為A、B、C、D 組；另取相同數量的未轉染細胞作為對照組（E 組）。培養(yǎng)4 周，采用RT-PCR 檢測hBMP-2、hVEGF165 以及骨鈣mRNA 表達，Western blot 檢測細胞 hBMP-2 和 hVEGF165 表達，定量檢測ALP 活性，免疫組織化學方法檢測Col Ⅰ表達。 結 果 與E 組比較，A 組hBMSCs 高表達hBMP-2、hVEGF165、Col Ⅰ及骨鈣素，B 組大量表達骨鈣素及Col Ⅰ，C組高表達hVEGF165，而B 組hVEGF165 及C 組hBMP-2 和Col Ⅰ的表達與D、E 組相似，呈陰性或僅有痕量表達。A、B、C、D 及E 組ALP 活性分別為0.91 ± 0.03、0.90 ± 0.02、0.64 ± 0.03、0.67 ± 0.01、0.66 ± 0.02，A、B 組與E 組比較差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05），C、D、E 組差異無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）。 結論 重組質粒通過陽離子脂質體能成功轉染hBMSCs，外源性hBMP-2 和 hVEGF165 基因在轉染細胞中能持續(xù)表達，并能增強hBMSCs 的成骨能力。
引用本文： 吳國平,何小川,楊智慧,郭力. 脂質體介導的重組質粒pIRES-hBMP-2-hVEGF165體外轉染對hBMSCs 成骨能力的影響. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(9): 1124-1128. doi: 復制