• 1 四川大學(xué)華西醫(yī)院 生物治療國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室? 干細(xì)胞與組織工程研究室(成都,610041);;
  • 2 四川省疾病預(yù)防控制中心毒理研究所;

目的 探討玻璃化凍存組織工程肌腱植入大鼠體內(nèi)修復(fù)跟腱缺損后不同時(shí)期,大鼠的免疫排斥反應(yīng)及對(duì)肝、腎、心血管功能的影響。 方法 抽取1 周齡SD 大鼠尾腱,采用組織塊法培養(yǎng)肌腱細(xì)胞。取第2 ~ 4 代肌腱細(xì)胞,以5 × 106 個(gè)/mL 細(xì)胞密度接種至長(zhǎng)1.5 cm 生物衍生肌腱材料,復(fù)合培養(yǎng)構(gòu)建組織工程肌腱。采用21%DMSO 作為玻璃化凍存保護(hù)液,Eurocollins solution 作為4℃條件下預(yù)冷液和洗脫液的基礎(chǔ)液體,按自制的玻璃化凍存方法凍存。健康SD大鼠72 只,雌雄不限,體重210 ~ 230 g。隨機(jī)分成A(n=32)、B(n=32)、C(n=8)3 組。A、B 組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于跟腱中段制備長(zhǎng)約0.5 cm 肌腱缺損模型,分別將玻璃化凍存后及未凍存的組織工程肌腱移植修復(fù)缺損肌腱;C 組大鼠未手術(shù),為正常對(duì)照。術(shù)后2、4、6、8 周,行大體觀察、肝、腎及心血管功能檢測(cè);術(shù)后2、4、6 周行血清免疫學(xué)檢測(cè)。 結(jié) 果 A、B 組植入部位均未見(jiàn)組織壞死、積液及化膿感染;術(shù)后2 周,A、B 組均出現(xiàn)粘連現(xiàn)象,4 ~ 6 周逐漸好轉(zhuǎn),8 周未見(jiàn)明顯粘連,新生組織連續(xù)性完整,肌腱橋接部已愈合,與正常肌腱類(lèi)似。術(shù)后2、4、6 周,血清中IgG 和IgM 含量A、B、C 組組間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05)。肝功能檢測(cè):A 組術(shù)后4 周,B 組術(shù)后4、6 周,谷草轉(zhuǎn)氨酶均低于C 組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  lt; 0.05);其余各時(shí)間點(diǎn)A、B 組谷草轉(zhuǎn)氨酶與C 組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05)。各時(shí)間點(diǎn)A、B 組谷丙轉(zhuǎn)氨酶、ALP、直接膽紅素和總膽紅素與C 組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05)。腎功能檢測(cè):術(shù)后2 周,A 組血清白蛋白和B 組肌酐明顯下降,與C 組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  lt; 0.05);術(shù)后4、6、8 周,A、B 組各指標(biāo)濃度與C 組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05)。心血管功能檢測(cè):A 組各時(shí)間點(diǎn)血糖、甘油三酯、膽固醇與C 組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05);B 組術(shù)后8 周甘油三酯與C 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  lt; 0.05)。 結(jié)論 玻璃化凍存的組織工程肌腱植入大鼠體內(nèi)修復(fù)跟腱缺損,未引起明顯免疫排斥反應(yīng),對(duì)肝、腎及心血管功能無(wú)明顯影響。

引用本文: 廖梅旭,劉程俊,朱明華,秦廷武. 玻璃化凍存組織工程肌腱體內(nèi)植入實(shí)驗(yàn)研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(10): 1229-1234. doi: 復(fù)制