目的 研究CD34+ 細胞體外誘導的肝樣細胞在小鼠體內(nèi)修復受損肝組織的作用。 方法 采用密度梯度離心法分離臍血中的單個核細胞并獲得富集CD34+ 細胞，調(diào)整細胞密度為1 × 105 個/mL，使用含干細胞生長因子（stem cell factor，SCF）、肝細胞生長因子（hepatocyte growth factor，HGF）、EGF、抑瘤素M（oncostatin M，OSM）和bFGF的無血清培養(yǎng)基（5 種細胞因子濃度分別為50、20、20、10、10 ng/mL）體外誘導10 d。取6 周齡雌性ICR 小鼠48 只，以二乙酰氟氨和CCl4 注射制備肝損傷模型。將小鼠隨機分為實驗組和對照組（n=24），實驗組將誘導后細胞（1.6 × 105 個 / 只，含CD34+ 細胞1 × 104 個）通過尾靜脈注射入肝損傷小鼠體內(nèi)，對照組注射等量無血清培養(yǎng)基，術后7、14、21、28 d 兩組分別處死6 只小鼠，行HE 染色、PCR 凝膠電泳、免疫組織化學染色及肝功能檢測。 結果 HE 染色顯示，對照組術后28 d時肝組織形態(tài)恢復正常，實驗組術后14 d 時即已恢復正常。PCR 凝膠電泳和免疫組織化學染色結果顯示，實驗組術后各個時間點在肝組織中均可檢測到表達人血清白蛋白的細胞，而對照組術后28 d 內(nèi)均未檢測到。肝功能檢測結果顯示，對照組術后14 d 時谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性恢復正常，實驗組小鼠術后7 d 時即已恢復正常；但兩組谷草轉(zhuǎn)氨酶活性在28 d 內(nèi)均未恢復。 結論 CD34+ 細胞經(jīng)體外向肝細胞方向誘導分化后，能在肝損傷的小鼠體內(nèi)促進受損肝組織形態(tài)和功能的恢復，并能在小鼠受損肝臟中轉(zhuǎn)化為人源肝細胞。
引用本文： 鄢玲莉,蔡海波,陳袆祺,譚文松. CD34+ 細胞體外誘導的肝樣細胞在小鼠體內(nèi)修復受損肝組織的研究. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(10): 1235-1240. doi: 復制