• 四川大學(xué)華西醫(yī)院 生物治療國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室? 干細(xì)胞與組織工程研究室(成都,610041);

目的 研究NGF 對(duì)人真皮成纖維細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、膠原合成和遷移的影響,探討NGF 在創(chuàng)傷修復(fù)中的作用。 方法 采用酶消化法體外分離培養(yǎng)人真皮成纖維細(xì)胞,取第3 代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。分別加入0、25、50、100、200、400 ng/mL NGF,培養(yǎng)48 h 采用MTT 法檢測(cè)細(xì)胞增殖;加入0、100 ng/mL NGF,培養(yǎng)48 h 采用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞有絲分裂周期,采用羥脯氨酸法檢測(cè)培養(yǎng)液膠原含量,實(shí)時(shí)熒光定量PCR 測(cè)定細(xì)胞Col Ⅰ、Col Ⅲ mRNA 表達(dá)水平;建立體外細(xì)胞劃痕創(chuàng)傷模型,加入0、50、100、200 ng/mL NGF,培養(yǎng)24 h 觀察細(xì)胞遷移。 結(jié)果 MTT 法檢測(cè)結(jié)果顯示,各濃度組間細(xì)胞增殖的吸光度值比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05)。在0、100 ng/mL NGF 作用下,細(xì)胞周期顯示兩組的G0/ G1 期、S 期、G2/M 期細(xì)胞百分率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05),羥脯氨酸法測(cè)得兩組細(xì)胞培養(yǎng)液膠原含量和實(shí)時(shí)熒光定量PCR 測(cè)定細(xì)胞Col Ⅰ、Col Ⅲ mRNA 表達(dá)水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05)。細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,培養(yǎng)24 h 后0、50、100、200 ng/mL NGF 濃度組細(xì)胞遷移率分別為52.12% ± 6.50%、80.67% ± 8.51%、66.33% ± 3.58% 和61.19% ± 0.97%,50、100 ng/mL NGF 可顯著促進(jìn)細(xì)胞遷移(P  lt; 0.05)。 結(jié)論 NGF 對(duì)人真皮成纖維細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期及Col Ⅰ、Col Ⅲ mRNA 表達(dá)無(wú)影響,不能促進(jìn)膠原合成,但能促進(jìn)人真皮成纖維細(xì)胞遷移。

引用本文: 甘樺麗,解慧琪,陳曉禾,羅靜聰. NGF 對(duì)人真皮成纖維細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、膠原合成及遷移影響的體外研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(11): 1350-1354. doi: 復(fù)制