目的 研究新型聯(lián)合基質——BMSCs- 去上皮細胞羊膜（denuded human amniotic membrane，DHAM）橋接大鼠脊髓橫斷性損傷斷端，促進軸突再生及提高后肢運動功能的作用。 方法 取健康產(chǎn)婦正常剖宮產(chǎn)術后自愿捐獻的羊膜，經(jīng)聯(lián)合消化法徹底去除表面上皮細胞制備DHAM，并行HE 染色觀察。健康4 周齡雌性Wistar 大鼠4 只，取骨髓行BMSCs 分離、培養(yǎng)，取第4 代細胞以PKH26 標記后，以1 × 105 個/cm2 密度接種于DHAM 上制備聯(lián)合基質（BMSCs-DHAM）。倒置相差顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡觀察BMSCs 生長狀態(tài)。另取8 周齡雌性Wistar 大鼠40 只，體重200 ～ 220 g， 制備T9 脊髓橫斷性損傷模型，隨機分為4 組，每組10 只。A、C 組分別用BMSCs-DHAM 和單純DHAM包裹脊髓的2 個 斷端，B、D組分別于脊髓損傷中心注射10 μL 細胞濃度為1 × 104 個/μL 的BMSCs 和等量生理鹽水。術后12 周采用BBB 運動評分檢測大鼠后肢運動功能恢復情況，行皮層運動誘發(fā)電位（motion evoked potential，MEP）測定；生物素化葡聚糖胺（biopinylated dextan amine，BDA）順行示蹤檢測及神經(jīng)絲蛋白200（neurofilament protein 200，NF-200）免疫熒光染色觀察。 結果 HE 染色顯示聯(lián)合消化法成功制備DHAM。鏡下觀察到BMSCs 在DHAM 上生長狀態(tài)良好。術后12 周，A 組BBB 評分達（12.50 ± 1.26）分，明顯高于其余各組（P lt; 0.05）。MEP 測定顯示，A 組潛伏期（3.52 ± 2.45） ms 及波幅（480.68 ± 18.41）μV，恢復效果優(yōu)于其余各組（P lt; 0.05）。BDA 順行示蹤觀察示，A 組損傷平面以下BDA 通過損傷部位的軸突再生率為54.12% ± 3.30%，均高于其余各組（P lt; 0.05）；且A 組NF-200 免疫熒光染色亦可見大量再生軸突通過損傷部位。 結 論 新型聯(lián)合基質BMSCs-DHAM 一定程度上提高了脊髓橫斷性損傷大鼠的后肢運動功能，是一種具有廣泛應用前景的基質材料
引用本文： 梁洪生,梁鵬,高愛麗,祁權,劉恩重,吳佳寧,徐小平. 新型聯(lián)合基質橋接大鼠脊髓橫斷性損傷斷端促進運動功能恢復實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(11): 1376-1381. doi: 復制