【摘 要】 目的 應(yīng)用酶法制備豬主動脈脫細(xì)胞基質(zhì)，并評價其生物學(xué)性能。 方法 取新鮮屠宰的16 根肉豬降主動脈，長10 ～ 12 cm，應(yīng)用0.1% 胰蛋白酶和0.01% EDTA 于37℃震蕩條件下脫除細(xì)胞成分，HE 和Masson 染色行脫細(xì)胞基質(zhì)的組織學(xué)觀察，掃描電鏡和透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)改變。應(yīng)用單軸拉伸方法比較脫細(xì)胞前和脫細(xì)胞后48、96 和120 h 時材料兩斷端厚度、極限抗張強度（ultimate tension stress，UTS）和斷裂伸長率（strain of failure，SOF），繪制應(yīng)力-應(yīng)變曲線。取成年雜種犬3 只，體重20 ～ 30 kg，雌雄不限。將脫細(xì)胞前后片狀主動脈基質(zhì)埋植于犬脊柱兩側(cè)皮下，分別
于埋植后1、3 和6 周取材，行HE 染色觀察，參照半定量的Wakitani 評分法，對取材時的大體形態(tài)、浸潤細(xì)胞種類和數(shù)量、新生血管等指標(biāo)進(jìn)行比較，觀察宿主炎性細(xì)胞反應(yīng)和脫細(xì)胞基質(zhì)變化。將犬內(nèi)皮細(xì)胞種植于豬脫細(xì)胞基質(zhì)，HE 染色和掃描電鏡觀察細(xì)胞相容性。 結(jié)果 HE 染色和電鏡檢查顯示在96 h 可將新鮮豬主動脈細(xì)胞成分脫除，Masson 染色顯示細(xì)
胞外纖維成分保留完整。脫細(xì)胞前后的動脈基質(zhì)厚度、UTS 和SOF 差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05），但UTS 顯示降低趨勢，SOF 則呈現(xiàn)增加趨勢，應(yīng)力- 應(yīng)變曲線呈現(xiàn)力學(xué)強度降低和延展性增加的變化趨勢。犬皮下埋植，各組脫細(xì)胞標(biāo)本炎性細(xì)胞浸潤明顯減輕，6 周時以成纖維細(xì)胞浸潤為主，且基質(zhì)中見新生毛細(xì)血管。半定量組織學(xué)評分，在大體觀察、浸潤細(xì)胞種類和數(shù)量方面與脫細(xì)胞前比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）；新生血管數(shù)量比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）。HE 染色和掃描電鏡顯示種植的內(nèi)皮細(xì)胞可在基質(zhì)表面形成單細(xì)胞層。 結(jié)論 應(yīng)用0.1% 胰蛋白酶和0.01% EDTA 持續(xù)振蕩96 h 制備的豬主動脈脫細(xì)胞基質(zhì)，在生物力學(xué)、免疫原性和細(xì)胞相容性方面可滿足血管組織工程的需要。
引用本文： 張建,吳英鋒,陳亮. 豬主動脈脫細(xì)胞基質(zhì)的簡化制備及生物學(xué)評價. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(3): 364-369. doi: 復(fù)制