研究人脂肪干細(xì)胞（adipose derived stem cells，ADSCs）在體外單層培養(yǎng)條件下誘導(dǎo)為血管平滑肌細(xì)胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）的可行性。 方法 應(yīng)用酶消化法消化人脂肪組織獲得ADSCs，基礎(chǔ)培養(yǎng)液培養(yǎng)傳代，取第1 代細(xì)胞用于誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)分兩組，ADSCs 以含5 ng/mL TGF-β1 及50 ng/mL PDGF-BB 的M-199 誘導(dǎo)液聯(lián)合誘導(dǎo)，作為誘導(dǎo)組；以含10% FBS 的M-199 培養(yǎng)液培養(yǎng)ADSCs 作為未誘導(dǎo)組。鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況；免疫熒光和RT-PCR 方法檢測(cè)平滑肌細(xì)胞特異標(biāo)記的表達(dá)情況；流式細(xì)胞儀檢測(cè)誘導(dǎo)陽性率。 結(jié)果 誘導(dǎo)組細(xì)胞形態(tài)形成平滑肌細(xì)胞特有的“峰- 谷”生長(zhǎng)模式，未誘導(dǎo)組細(xì)胞形態(tài)未發(fā)生改變，與原代ADSCs 相似呈成纖維細(xì)胞樣生長(zhǎng)。誘導(dǎo)培養(yǎng)14 d，誘導(dǎo)組細(xì)胞體外擴(kuò)增能力較未誘導(dǎo)組顯著降低（P lt; 0.01）。免疫熒光檢測(cè)：誘導(dǎo)組表達(dá)平滑肌特異標(biāo)記α 平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、平滑肌肌球蛋白重鏈（smooth muscle-myosin heavy chain，SMMHC）和Calponin，未誘導(dǎo)組無表達(dá)。細(xì)胞誘導(dǎo)前α-SMA、SM-MHC及Calponin 陽性表達(dá)率分別為3.26% ± 1.31%、3.55% ±1.60%、4.02% ± 1.81%；誘導(dǎo)組陽性表達(dá)率分別為48.13% ± 8.31%、45.33% ± 10.68%、39.13% ± 9.42%；誘導(dǎo)前、后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）。RT-PCR 檢測(cè)：誘導(dǎo)組表達(dá)平滑肌特異標(biāo)記α-SMA、SM-MHC、Calponin 和SM-22α，未誘導(dǎo)組無表達(dá)。 結(jié) 論 脂肪干細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)及誘導(dǎo)后，呈明顯的VSMCs 特性，有可能成為血管組織工程新的種子細(xì)胞來源。
引用本文： 楊平,尹爍,崔磊,李宏,吳瑩琛,劉偉,曹誼林. 脂肪干細(xì)胞向血管平滑肌細(xì)胞誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(4): 481-486. doi: 復(fù)制
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