【摘 要】 目的 采用海藻酸鈉凝膠（sodium alginate，A）復(fù)合異種骨的方法，構(gòu)建骨組織工程載體，觀察載體中細(xì)胞的生物性能及體內(nèi)成骨能力，為構(gòu)建效率更高的骨組織工程載體提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 取2 只2 周齡新西蘭兔的骨髓，以rhBMP-2（1 × 10-8 mol/L）誘導(dǎo)培養(yǎng)BMSCs。取誘導(dǎo)后第2 代BMSCs 接種于1%（V/W）A 中，培養(yǎng)4 d HE 染色觀察凝膠中細(xì)胞形態(tài)。將第2 代BMSCs 分為單純DMEM 凝膠組和含1% A 的DMEM 凝膠組，培養(yǎng)7 d 后行BMP-2免疫組織化學(xué)染色觀察。第2 代BMSCs 與2%（V/W）A 的DMEM 凝膠混合，負(fù)壓下復(fù)合去抗原牛松質(zhì)骨（xenograftbone，X），4 d 后掃描電鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。取24 只裸鼠，隨機(jī)分為2 組（n=12），于兩側(cè)股部肌袋中分別植入BMSCs-A-X 復(fù)合體作為實(shí)驗(yàn)組，BMSCs-X 復(fù)合體作為對(duì)照組。于術(shù)后2、4 周后組織學(xué)觀察復(fù)合體成骨情況，圖像分析系統(tǒng)分析各組成骨或軟骨的面積百分比。 結(jié)果 HE 染色觀察，培養(yǎng)4 d A 中BMSCs 細(xì)胞形態(tài)飽滿，細(xì)胞懸浮于凝膠中，可見(jiàn)細(xì)胞分裂和核分裂相。單純DMEM 凝膠組和含1% A 的DMEM 凝膠組免疫組織化學(xué)觀察，細(xì)胞分裂增殖正常，伸出多種形態(tài)的突起，胞核大，核仁清晰。單純DMEM 凝膠組BMP-2 表達(dá)陽(yáng)性率為44.10% ± 3.02%；含1% A 的DMEM 凝膠組為42.40% ± 4.83%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。掃描電鏡觀察：A 均勻復(fù)合于X 微孔中，不同平面均有細(xì)胞生長(zhǎng)。植入裸鼠體內(nèi)2 周后，實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組中均有軟骨和骨組織形成；實(shí)驗(yàn)組軟骨面積百分比為7.31% ± 0.32%，骨為5.26% ± 0.24%；對(duì)照組軟骨為2.31% ± 0.21%，骨為2.16% ± 0.22%；兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。術(shù)后4 周，兩組軟骨和新生骨小梁及骨髓組織較2 周時(shí)增多；實(shí)驗(yàn)組軟骨面積百分比為9.31% ± 0.31%，骨為7.26% ± 0.26%；對(duì)照組軟骨為3.31% ± 0.26%，骨為2.26% ± 0.28%；兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。術(shù)后2、4 周同組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié) 論 以A-X 構(gòu)建骨組織工程載體，符合組織工程載體的超結(jié)構(gòu)原理，最大限度地承載細(xì)胞，生物性能好，對(duì)BMSCs 增殖和成骨表型及相關(guān)的生物性能無(wú)不良影響，在體內(nèi)成骨效率較高。
引用本文： 孫磊,張柏青,陳磊,陶劍鋒,江健,孟國(guó)林,竇榆生,徐建強(qiáng),劉丹平,胡蘊(yùn)玉. 海藻酸鈉凝膠復(fù)合異種骨構(gòu)建組織工程骨及體內(nèi)成骨. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(6): 732-736. doi: 復(fù)制