• 1 河南省腫瘤醫(yī)院骨科(鄭州,450008);;
  • 2 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院骨科;;
  • 3 重慶市中山醫(yī)院骨科;;
  • 4 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院骨科;

【摘 要】 目的 比較不同化學(xué)方法制備去細(xì)胞神經(jīng)支架的效果,提供有效的組織工程神經(jīng)支架。 方法 2 月齡雄性SD 大鼠15 只,體重200 ~ 250 g,取雙側(cè)坐骨神經(jīng),隨機分為3 組,每組10 條。根據(jù)處理方法不同,A 組為正常未處理組;B 組為傳統(tǒng)Sondell 法化學(xué)處理組;C 組為采用Triton X-200、SB-10、SB-16 處理的改良法組。制備后行HE 染色、免疫組織化學(xué)染色及掃描電鏡觀察,并對去細(xì)胞程度、脫髓鞘程度及神經(jīng)纖維管道完整性進(jìn)行量化評價。 結(jié)果 HE 染色:A 組神經(jīng)纖維橫斷面呈圓形,胞核呈深藍(lán)色,髓鞘呈網(wǎng)格狀結(jié)構(gòu);B 組軸突及細(xì)胞核均消失,神經(jīng)內(nèi)膜結(jié)構(gòu)破壞明顯;C 組軸突及細(xì)胞核均消失,神經(jīng)內(nèi)膜形成不規(guī)則圓形空腔。層粘連蛋白免疫組織化學(xué)染色:A 組基底膜圍繞在髓鞘外周,中間有藍(lán)染SC 核;B 組SC 核及髓鞘結(jié)構(gòu)消失,神經(jīng)基底膜結(jié)構(gòu)不完整;C 組SC 核及髓鞘結(jié)構(gòu)消失,神經(jīng)基底膜形成不規(guī)則圓形空腔。S-100 蛋白免疫組織化學(xué)染色:A 組SC 及髓鞘呈棕褐色;B 組及C 組未見明顯髓鞘染色。掃描電鏡觀察:A 組髓鞘、軸突等內(nèi)容物形態(tài)清晰;B 組髓鞘、軸突等結(jié)構(gòu)均消失,基膜管壁排列欠規(guī)則;C 組基膜管壁膠原纖維排列有序。去細(xì)胞程度及髓鞘染色深度評分:B、C 組均優(yōu)于A 組(P  lt; 0.05),其中髓鞘染色深度評分C 組均優(yōu)于B 組(P  lt; 0.05);神經(jīng)纖維管道完整性評分:C 組優(yōu)于B 組(P  lt; 0.05),與A 組相似(P  gt; 0.05);綜合評價去細(xì)胞處理方法以C 組方法為佳。 結(jié) 論 改良法所獲得的去細(xì)胞神經(jīng)的去細(xì)胞效果與傳統(tǒng)Sondell 法相似,而脫髓鞘及組織結(jié)構(gòu)保留的效果優(yōu)于后者,可作為一種新的神經(jīng)支架材料。

引用本文: 高嵩濤,鄧展生,李寶軍,張勝利,郭曉檸. 不同去細(xì)胞神經(jīng)支架制備方法的對比研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(7): 851-855. doi: 復(fù)制