• 復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院手外科(上海,200040);

目的 研究異體神經(jīng)干細胞(neural stem cell,NSC)移植于切斷的周圍神經(jīng)遠端,延緩失神經(jīng)肌肉萎縮的作用,并探討其發(fā)揮作用的可能機制。 方法 取2 只孕12 ~ 14 d 綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)轉(zhuǎn)基因大鼠,取其胚胎并體外分離培養(yǎng)脊髓NSC。選取2 月齡健康成年F344 雌性大鼠32 只,體重(180 ± 20)g,隨機分為實驗組和對照組(n=16)。于右股部膝關(guān)節(jié)上1.5 cm 處水平切斷脛神經(jīng)及腓總神經(jīng),近端反折縫合,建立小腿三頭肌失神經(jīng)支配模型。實驗組:將制備的5 μL GFP-NSC 懸液自脛神經(jīng)遠側(cè)斷端進針1 cm 后緩慢注入脛神經(jīng)內(nèi);對照組:同法注入等量NSC 培養(yǎng)上清液。術(shù)后觀察大鼠一般情況,于術(shù)后4 周及12 周取材,測量小腿三頭肌濕重,行肌肉HE 染色、Mal lory 三色染色及突觸后膜染色,觀察并測量肌纖維橫截面積維持率及肌肉突觸后膜的形態(tài)和面積。 結(jié)果 各組大鼠傷口均Ⅰ期愈合,右側(cè)后肢無潰瘍發(fā)生。術(shù)后4 周和12 周,右側(cè)小腿三頭肌濕重,實驗組分別為(0.849 ± 0.064)g 和(0.596 ± 0.047)g,對照組分別為(0.651 ± 0.040)g 和(0.298 ± 0.016)g,同時間點組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P  lt; 0.05)。術(shù)后4 周與12 周,骨骼肌纖維橫截面積維持率實驗組分別為72.55% ± 8.12% 和58.96% ± 6.07%,對照組分別為50.23% ±4.76% 和33.63% ± 4.41%;實驗組均優(yōu)于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P  lt; 0.05)。失神經(jīng)肌肉經(jīng)Mallory 三色染色,術(shù)后4 周可見肌纖維之間已有大量膠原纖維增生;術(shù)后12 周,膠原纖維進一步增多,大部分肌肉纖維被取代,但實驗組纖維化程度輕于對照組。術(shù)后12 周,實驗組突觸后膜面積為(137.29 ± 29.14)μm2,更接近于正常(198.63 ± 23.11)μm2,達對照組(61.03 ± 11.38)μm2 的2 倍以上,各組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P  lt; 0.05)。 結(jié)論 異體胚胎脊髓NSC 體內(nèi)移植可發(fā)揮延緩失神經(jīng)肌肉萎縮和維持失神經(jīng)肌肉突觸后膜形態(tài)、功能的作用,為臨床上周圍神經(jīng)損傷后肌肉萎縮的防治提供了新的思路和方法。

引用本文: 沈云東,徐建光,徐文東,徐雷,陸九州,顧玉東. 神經(jīng)干細胞移植延緩失神經(jīng)肌肉萎縮的實驗研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(9): 1051-1055. doi: 復(fù)制