目的 通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察、細(xì)胞黏附和細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)觀察多孔CPC 材料作為組織工程肋骨支架的可行性。 方法 取幼豬骨髓分離培養(yǎng)BMSCs 并傳代，另自制5 mm × 5 mm × 5 mm 大小的多孔CPC 材料，micro-CT 觀察孔徑、孔隙率及羥基磷灰石（hydroxyapatite，HA）含量，并與人正常松質(zhì)骨作對(duì)比。取24 孔培養(yǎng)板，于孔內(nèi)置入多孔CPC 材料1 塊，共15 塊，調(diào)整第1 代BMSCs 濃度為6 × 105 個(gè)/mL，將細(xì)胞懸液150 μL 滴加到多孔CPC 材料上，置于孵育箱中復(fù)合培養(yǎng)4、12、24 h 后，收集細(xì)胞并計(jì)數(shù)，計(jì)算細(xì)胞黏附率；行倒置相差顯微鏡觀察、MTT 法檢測(cè)多孔CPC 材料表面BMSCs 的生長(zhǎng)情況；掃描電鏡觀察接種BMSCs 7 d 的多孔CPC 材料，并與單純多孔CPC 材料和正常人松質(zhì)骨對(duì)比。 結(jié) 果 BM SCs 與多孔CPC 材料復(fù)合培養(yǎng)4、12、24 h 的細(xì)胞黏附率分別為28.00% ± 0.98%、46.70% ± 1.14%和48.50% ± 1.18%。MTT 法檢測(cè)細(xì)胞與材料復(fù)合培養(yǎng)1、2、3、4、5、6 d 的吸光度（A）值分別為1.103 ± 0.214、1.557 ±0.322、1.920 ± 0.178、2.564 ± 0.226、2.951 ± 0.415 和3.831 ± 0.328，呈明顯上升趨勢(shì)。倒置相差顯微鏡下可見(jiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛，貼壁良好，未出現(xiàn)毒性反應(yīng)。micro-CT 檢查示多孔CPC 材料的孔徑均衡，且互相連通，HA 含量為（1 101.222 8 ±0.618 4） mg/ ccm，孔隙率為70.26% ± 0.45%；人正常松質(zhì)骨HA 含量為（1 072.552 3 ± 0.744 2）mg/ccm，孔隙率為72.82% ± 0.51%；兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。掃描電鏡觀察單純多孔CPC 材料孔徑與正常人松質(zhì)骨孔徑大小、結(jié)構(gòu)相似，且互相連通；BMSCs 在多孔CPC 材料表面排列有序，細(xì)胞呈片狀，部分呈簇狀，細(xì)胞形態(tài)呈多邊形，細(xì)胞間可見(jiàn)較多細(xì)胞間質(zhì)。 結(jié)論 多孔CPC 材料結(jié)構(gòu)和成分均接近正常人松質(zhì)骨，BMSCs 在其表面生長(zhǎng)良好，適合作為組織工程肋骨支架材料，但其對(duì)細(xì)胞的黏附性有待進(jìn)一步改善。
引用本文： 唐華,徐志飛,劉昌勝,秦雄,吳彬,烏立暉. 多孔CPC 組織工程肋骨支架制備及BMSCs 在其表面增殖黏附的實(shí)驗(yàn)研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(10): 1238-1241. doi: 復(fù)制