目的 探索G蛋白偶聯(lián)受體激酶結(jié)合蛋白1(G protein coupledreceptor kinase interacting protein 1, GIT1)的RNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)(hairpin)(GIT1-RNAh)對(duì)成骨細(xì)胞遷移的影響，并分析其機(jī)制。方法 取培養(yǎng)至第6代的鼠成骨細(xì)胞，隨機(jī)分成兩組，分別用包含GIT1-RNAh(實(shí)驗(yàn)組)和綠色熒光蛋白(green fluoresenceprotein, GFP)的RNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)(GFPRNAh)的腺病毒(對(duì)照組)感染12 h后，再將每組分成有、無(wú)血小板源性生長(zhǎng)因子(platelet drived growth factor, PDGF)刺激的兩組。免疫熒光染色方法檢測(cè)成骨細(xì)胞內(nèi)源性GIT1蛋白表達(dá)和Paxillin的位置。 Western Blot檢測(cè)Paxillin的磷酸化。 構(gòu)建包含藍(lán)色熒光蛋白的GIT1-RNAh(CFP-GIT1-RNAh)實(shí)驗(yàn)組和GFP-RNAh(CFP-GFP-RNAh)(對(duì)照組)， 免疫熒光雙染的方法檢測(cè)CFP-GIT1-RNAh和 CFP-GFP-RNAh對(duì)Paxillin位置的特異性作用。 用劃痕愈合法檢測(cè)GIT1-RNAh(實(shí)驗(yàn)組)和GFP-RNAh(對(duì)照組) 腺病毒對(duì)成骨細(xì)胞在PDGF刺激下的遷移能力的影響。結(jié)果 免疫組織化學(xué)觀察，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組比較，明顯抑制成骨細(xì)胞內(nèi)源性的GIT1蛋白表達(dá)和擾亂Paxillin的分布。 Western Blot觀察，和對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組明顯抑制了Paxiliin的磷酸化(P＜0.05)。劃痕愈合法檢測(cè)觀察，和對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組明顯抑制成骨細(xì)胞的遷移。結(jié)論 GIT1-RNAh通過(guò)擾亂Paxillin的分布和其磷酸化從而抑制成骨細(xì)胞的遷移。

引用本文： 張寧,胡志毅,殷國(guó)勇,范衛(wèi)民,陶松年,王道新,董天華. G蛋白偶聯(lián)受體激酶結(jié)合蛋白1發(fā)夾結(jié)構(gòu)通過(guò)影響Paxillin的功能抑制成骨細(xì)胞遷移. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2007, 21(1): 1-5. doi: 復(fù)制