目的 探討自行合成的骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2，BMP-2)活性多肽對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（marrow mesenchymal stem cells，MSCs）體外定向誘導(dǎo)成骨的能力，評(píng)價(jià)BMP-2活性多肽的成骨誘導(dǎo)性及誘導(dǎo)成骨的劑量依賴(lài)性 方法取4周齡Wistar大鼠分離培養(yǎng)MSCs，傳至第3代時(shí)改用條件培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中分別加入濃度為300、200、100、50及0 μg/ml的BMP2活性多肽，并依次記為A、B、C、D和E組。細(xì)胞培養(yǎng)至5、10、15及20 d，檢測(cè)堿性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性，測(cè)定鈣含量，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（fluorescent quantitative PCR，F(xiàn)QPCR)檢測(cè)Ⅰ型膠原、骨橋蛋白 (osteopontin，OPN) 及骨鈣素（osteocalcin，OCN） mRNA的表達(dá)，檢測(cè)不同濃度BMP2活性多肽體外誘導(dǎo)成骨的能力。結(jié)果 倒置相差顯微鏡下觀(guān)察，用條件培養(yǎng)基培養(yǎng)3～4 d后，培養(yǎng)細(xì)胞由長(zhǎng)梭形轉(zhuǎn)變?yōu)槎趟笮位蚨嘟切?。隨條件培養(yǎng)基中BMP-2活性多肽濃度的增加，細(xì)胞發(fā)生成骨樣改變的時(shí)間提前。ALP活性和鈣含量檢測(cè)顯示，A組和B組較其他組增加明顯，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt;0.05），但A、B組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt;0.05）。FQ-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)不同濃度條件培養(yǎng)基培養(yǎng)14 d后，Ⅰ型膠原、OPN和OCN mRNA在各組均有表達(dá)。Ct值表明其表達(dá)量的大小順序?yàn)锳、B、C、D組，E組無(wú)表達(dá)，A組和B組的Ct值明顯大于C組和D組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt;0.05），但A組和B組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt;0.05）。結(jié)論 BMP-2活性多肽能有效地促進(jìn)MSCs向成骨方向分化，其誘導(dǎo)作用存在劑量依賴(lài)關(guān)系，最佳誘導(dǎo)劑量為200 μg/ml。

引用本文： 段智霞,鄭啟新,郭曉東,袁泉,陳順廣. 骨形成蛋白2活性多肽體外定向誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨方向分化的劑量依賴(lài)性研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2007, 21(10): 1118-1122. doi: 復(fù)制