目的 建立人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（human marrow mesenchymalstem cells ,hMSCs）體外低氧培養(yǎng)及向成骨細(xì)胞分化的生物模型，研究其生物學(xué)特征，為骨組織工程提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法 采用人淋巴細(xì)胞分離液分離健康成人hMSCs，DMEM-LG（含20％胎牛血清）中培養(yǎng)，10～14 d后傳代培養(yǎng)。取第2代細(xì)胞，根據(jù)培養(yǎng)氧濃度及培養(yǎng)基類型分為4組：正常氧組（20％O.2加DMEM-LG，A組）、低氧組（1％O.2加DMEM-LG，B組）、正常氧成骨誘導(dǎo)組（20％O.2加條件培養(yǎng)基，C組）及低氧成骨誘導(dǎo)組（1％O.2加條件培養(yǎng)基，D組），通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞增殖測(cè)定（MTT法）、集落形成檢測(cè)、RT-PCR檢測(cè)、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性檢測(cè)及茜素紅染色，研究低氧環(huán)境對(duì)hMSCs生物學(xué)行為的影響。結(jié)果 與A組相比，B組及D組中的hMSCs有較高的增殖速度，并且不受條件培養(yǎng)基的影響，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。B組中的hMSCs生成的集落逐漸增多，A組9 d后生成的集落數(shù)基本不發(fā)生變化。D組培養(yǎng)的hMSCs 的ALP活性逐漸增高，但明顯低于C組，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。定量RT-PCR檢測(cè)，C組ALP、骨鈣素、Ⅰ型膠原蛋白及骨粘連蛋白mRNA表達(dá)量明顯增加（P＜0.01)。培養(yǎng)4周后，與其他3組相比，C組可見到明顯的鈣鹽沉積和染成紅色的鈣結(jié)節(jié)。結(jié)論 低氧使hMSCs增殖率增加，集落形成能力增強(qiáng)，抑制向成骨細(xì)胞分化。

引用本文： 王慶德,楊述華,楊操,葉哲偉,胡勇. 成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外低氧培養(yǎng)及生物學(xué)特征. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2007, 21(10): 1128-1132. doi: 復(fù)制