目的 研究堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)、轉(zhuǎn)化生長因子β1 (transforming growth factor β1，TGF-β1)、胰島素樣生長因子1(insulinlike growth factor 1，IGF-1)單獨或聯(lián)合作用于人胚半月板細(xì)胞，探討半月板組織工程種子細(xì)胞大量擴(kuò)增最佳作用組合及濃度。方法 無菌條件下取健康婦女意外流產(chǎn)并自愿捐獻(xiàn)的4個月人胚半月板，體外分離、培養(yǎng)半月板纖維軟骨細(xì)胞，用Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色和Aggrecan免疫熒光染色檢測其性狀。取第3代細(xì)胞貼壁后使用血清饑餓法同步化細(xì)胞，加入IGF-1（1、10、50、100 μg/L）、TGF-β1(0.1、1.0、5.0、10.0、50.0 μg/L)、bFGF(5、10、50、100、200 μg/L)作用于半月板細(xì)胞,每樣本設(shè)8個復(fù)孔和陰性對照組，分別于作用后48 h和72 h采用MTT法檢測軟骨細(xì)胞增殖情況，以確定各生長因子最佳效應(yīng)濃度。同法設(shè)7個組，每組8個復(fù)孔，分別為：陰性對照組、bFGF最佳效應(yīng)濃度組(50 μg/L)、TGF-β1最佳效應(yīng)濃度組(5 μg/L)、IGF-1最佳效應(yīng)濃度組（50 μg/L）、bFGF 和TGF-β1最佳效應(yīng)濃度聯(lián)用組、bFGF和IGF-1最佳效應(yīng)濃度聯(lián)用組、TGF-β1和IGF-1最佳效應(yīng)濃度聯(lián)用組，48 h和72 h用MTT比色法得出吸光度（A）值并分析軟骨細(xì)胞的增殖效應(yīng)。結(jié)果 第3代半月板細(xì)胞擴(kuò)增前后細(xì)胞均表達(dá)Ⅱ型膠原和Aggrecan蛋白。48 h和72 h 50 μg/L IGF-1，5 μg/L TGF-β1及50 μg/L bFGF濃度組與對照組相比均具有促細(xì)胞增殖作用，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；此即為各生長因子最佳效應(yīng)濃度。生長因子聯(lián)用：bFGF 50 μg/L與IGF-1 50 μg/L聯(lián)用、IGF-150 μg/L與TGF-β1 5 μg/L聯(lián)用具有協(xié)同效應(yīng)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)； bFGF 50 μg/L與TGF-β1 5 μg/L聯(lián)用無協(xié)同效應(yīng)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論 bFGF、TGF-β1、IGF-1單獨使用均可體外擴(kuò)增人胚半月板細(xì)胞，最佳效應(yīng)濃度聯(lián)用時bFGF/IGF-1、IGF-1/TGF-β1的擴(kuò)增效果優(yōu)于各自單獨使用，可用于體外大量擴(kuò)增種子細(xì)胞。

引用本文： 葉川,鄧展生,李寶軍,周全,申定珠,郭曉檸,高嵩濤,許宇霞. 三種生長因子對人胚半月板細(xì)胞增殖及細(xì)胞表型的影響. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2007, 21(10): 1137-1141. doi: 復(fù)制