• 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院骨科(武漢,430030);

目的 觀察重組人骨形成蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein 2,rhBMP-2)與骨誘導(dǎo)劑對SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 (mesenchymalstem cells, MSCs)的增殖與成骨作用。 方法 體外培養(yǎng)大鼠MSCs,分為實(shí)驗(yàn)組與對照組。對照組:不加rhBMP-2與骨誘導(dǎo)劑。實(shí)驗(yàn)組:骨誘導(dǎo)劑單獨(dú)作用于SD大鼠MSCs(A組);rhBMP-2分別以濃度為10(B組)、50 (C組)、100 (D組)、200 μg/L (E組)單獨(dú)作用于SD大鼠MSCs;rhBMP-2分別以濃度為10 (F組)、50 (G組)、100 (H組)、200 μg/L(I組)聯(lián)合骨誘導(dǎo)劑作用于SD大鼠MSCs。測定第3、6、9、12天的增殖狀況(MTT法)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和骨鈣素(osteocalcin,OC)水平。 結(jié)果 倒置相差顯微鏡觀察SD大鼠MSCs原代培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞接種12 h后即可貼壁;48 h細(xì)胞成梭形,形似成纖維細(xì)胞;4 d時(shí)細(xì)胞為多角形、紡錘形;6 d時(shí),成纖維細(xì)胞散在分布,少量呈集落樣生長,為漩渦狀、放射狀排列;10 d左右,細(xì)胞基本鋪滿瓶底,融合成片。傳代細(xì)胞5~7 d即可長滿瓶底。各時(shí)間點(diǎn)A~I組均能顯著促進(jìn)MSCs成骨活性(ALP和OC)的表達(dá)。B~E組同時(shí)具有促進(jìn)MSCs 增殖作用,并呈濃度依賴性;F~I組增殖及ALP、OC含量均高于A~E組,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論 rhBMP-2與骨誘導(dǎo)劑聯(lián)合作用可在促進(jìn)MSCs增殖的同時(shí)提高其成骨活性。

引用本文: 楊小榮,方煌,羅永湘. 重組人骨形成蛋白2與骨誘導(dǎo)劑對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖分化的影響. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2007, 21(2): 140-144. doi: 復(fù)制