目的 研究大鼠頜下腺細(xì)胞在膠原海綿材料支架上的生長(zhǎng)情況?!》椒ā∪? d 齡W istar 大鼠頜下腺細(xì)胞, 傳代培養(yǎng)至第2 代細(xì)胞, 按2×104 ouml;m l 注射法接種于5mm ×5mm ×2mm 膠原海綿表面進(jìn)行培養(yǎng)。術(shù)后1、2、3 周行組織學(xué)觀察、掃描電鏡觀察膠原海綿上接種頜下腺細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn); 取復(fù)合培養(yǎng)3 周的頜下腺細(xì)胞行免疫組織化學(xué)細(xì)胞角蛋白(cytok rat in 8113, CK8113)、A2平滑肌肌動(dòng)蛋白(A2smoo th muscular act in, A2SMA ) 染色, 透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu), 鑒定細(xì)胞來源。分別取復(fù)合培養(yǎng)1 d, 1、2、3 周的培養(yǎng)上清, 用Amano 法測(cè)定淀粉酶含量, 檢測(cè)與膠原海綿復(fù)合培養(yǎng)的頜下腺細(xì)胞功能?!〗Y(jié)果 細(xì)胞接種后第1 周細(xì)胞分散于材料表面, 無細(xì)胞突起形成; 第2 周細(xì)胞數(shù)量有所增加、細(xì)胞突起形成并錨定于膠原海綿表面; 第3 周時(shí)附著的細(xì)胞數(shù)目增多, 可見細(xì)胞表層有絲狀纖維形成。免疫組織化學(xué)染色觀察復(fù)合培養(yǎng)的頜下腺細(xì)胞上皮細(xì)胞特異性抗體CK8. 13 呈強(qiáng)陽(yáng)性, 肌上皮細(xì)胞特異性抗體A2SMA 染色呈陽(yáng)性。透射電鏡下頜下腺上皮細(xì)胞表面可見微絨毛、胞漿皺褶和細(xì)胞頂部的酶原顆粒, 胞核大卵圓形, 胞質(zhì)內(nèi)見線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。隨著接種后培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng), 與膠原海綿復(fù)合培養(yǎng)的頜下腺細(xì)胞分泌的淀粉酶含量有不同程度的增加?!〗Y(jié)論 膠原海綿具有良好的細(xì)胞相容性, 頜下腺細(xì)胞與膠原海綿復(fù)合培養(yǎng), 細(xì)胞可保持增殖分化能力及分泌功能, 有望成為頜下腺細(xì)胞的載體應(yīng)用于組織工程支架材料。
引用本文: 周青,朱耀,鄧春富,王玉新. 組織工程頜下腺細(xì)胞與膠原海綿復(fù)合培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2007, 21(2): 160-164. doi: 復(fù)制
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