• 中國醫(yī)科大學口腔醫(yī)學院口腔頜面外科(沈陽, 110001);

目的 研究大鼠頜下腺細胞在膠原海綿材料支架上的生長情況。 方法 取8 d 齡W istar 大鼠頜下腺細胞, 傳代培養(yǎng)至第2 代細胞, 按2×104 ouml;m l 注射法接種于5mm ×5mm ×2mm 膠原海綿表面進行培養(yǎng)。術(shù)后1、2、3 周行組織學觀察、掃描電鏡觀察膠原海綿上接種頜下腺細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)特點; 取復合培養(yǎng)3 周的頜下腺細胞行免疫組織化學細胞角蛋白(cytok rat in 8113, CK8113)、A2平滑肌肌動蛋白(A2smoo th muscular act in, A2SMA ) 染色, 透射電鏡觀察細胞超微結(jié)構(gòu), 鑒定細胞來源。分別取復合培養(yǎng)1 d, 1、2、3 周的培養(yǎng)上清, 用Amano 法測定淀粉酶含量, 檢測與膠原海綿復合培養(yǎng)的頜下腺細胞功能。 結(jié)果 細胞接種后第1 周細胞分散于材料表面, 無細胞突起形成; 第2 周細胞數(shù)量有所增加、細胞突起形成并錨定于膠原海綿表面; 第3 周時附著的細胞數(shù)目增多, 可見細胞表層有絲狀纖維形成。免疫組織化學染色觀察復合培養(yǎng)的頜下腺細胞上皮細胞特異性抗體CK8. 13 呈強陽性, 肌上皮細胞特異性抗體A2SMA 染色呈陽性。透射電鏡下頜下腺上皮細胞表面可見微絨毛、胞漿皺褶和細胞頂部的酶原顆粒, 胞核大卵圓形, 胞質(zhì)內(nèi)見線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。隨著接種后培養(yǎng)時間的延長, 與膠原海綿復合培養(yǎng)的頜下腺細胞分泌的淀粉酶含量有不同程度的增加?!〗Y(jié)論 膠原海綿具有良好的細胞相容性, 頜下腺細胞與膠原海綿復合培養(yǎng), 細胞可保持增殖分化能力及分泌功能, 有望成為頜下腺細胞的載體應(yīng)用于組織工程支架材料。

引用本文: 周青,朱耀,鄧春富,王玉新. 組織工程頜下腺細胞與膠原海綿復合培養(yǎng)的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2007, 21(2): 160-164. doi: 復制