• 第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所皮膚科(重慶,400042);

目的 尋找最適于組織工程皮膚生長及基底膜構(gòu)建的體外培養(yǎng)基鈣濃度。 方法 按照魯元剛等建立的方法制備復(fù)方殼多糖組織工程皮膚,根據(jù)培養(yǎng)基鈣濃度不同,分為1.00、1.45、1.65和1.95 mmol/L四組。在37℃、5% CO2及90%以上濕度孵箱內(nèi)浸沒培養(yǎng)3 d后,將培養(yǎng)物置于不銹鋼篩網(wǎng)上進行氣液界面三維培養(yǎng),每天換液1次。培養(yǎng)7、15 d,行HE、PAS染色觀察組織工程皮膚的組織學特性;并利用免疫組織化學染色對基底膜的主要成分——Ⅳ型膠原進行觀察,評價基底膜構(gòu)建情況。 結(jié)果 各組組織工程皮膚組織學觀察類似正常皮膚,有分化良好的表皮和致密真皮,但1.95 mmol/L組表皮分化較其他組更好;1.00、1.45及1.65 mmol/L組角化層外側(cè)常伴未角化的角質(zhì)形成細胞,1.95 mmol/L組表皮細胞角化完全,且與顆粒層細胞結(jié)合牢固。PAS染色顯示各組真、表皮間有紫紅色帶狀結(jié)構(gòu);免疫組織化學染色顯示真皮與表皮間Ⅳ型膠原反應(yīng)呈陽性,且1.95 mmol/L組陽性反應(yīng)強于1.00 mmol/L組。 結(jié)論 鈣濃度為1.95 mmol/L的培養(yǎng)基最適合于復(fù)方殼多糖組織工程皮膚生長及基底膜構(gòu)建。

引用本文: 魯元剛,伍津津,雷霞,張教揚,朱堂友,楊桂紅,楊濤. 培養(yǎng)基鈣濃度對復(fù)方殼多糖組織工程皮膚基底膜構(gòu)建的形態(tài). 中國修復(fù)重建外科雜志, 2007, 21(3): 298-301. doi: 復(fù)制