• 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院整復(fù)外科(上海,200011);

目的 研究神經(jīng)再生條件液(nerve regeneration conditioned fluid, NRCF)中具有神經(jīng)再生趨化活性的蛋白成分,對相對分子質(zhì)量為(232~440)×103的蛋白條帶進一步行分離和定性。方法 新西蘭大白兔6只,體重1.8~2.5 kg,取坐骨神經(jīng)建立神經(jīng)再生室模型。術(shù)后7 d采集NRCF進行自然聚丙烯酰胺凝膠電泳(native-polyacrylamide gel electrophoresis,Native-PAGE)分離,切取相對分子質(zhì)量為(232~440)×103區(qū)域的蛋白條帶,采用Shotgun蛋白質(zhì)組學(xué)策略、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜對其組分進行定性分析。 結(jié)果 NRCF的Native-PAGE電泳結(jié)果顯示,相對分子質(zhì)量在669×103以上、(232~440)×10.3和(140~232)×103分別有1條蛋白帶,在(67~140)×103有6條蛋白帶。其中相對分子質(zhì)量在(232~440)×103的蛋白條帶共鑒定到54種蛋白質(zhì),主要集中在等電點5.5~8.0,相對分子質(zhì)量為(10~40)×103范圍內(nèi),其中4種是未命名蛋白質(zhì)。這54種蛋白質(zhì)可歸類為結(jié)合蛋白(43%)、轉(zhuǎn)運蛋白(30%)、酶(6%)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白(4%)和分子功能未知(17%)。54種蛋白質(zhì)的亞細(xì)胞定位主要是分泌性蛋白(63%),其他的位于細(xì)胞膜和胞漿內(nèi)等。結(jié)論 采用Native-PAGE和Shotgun蛋白質(zhì)組學(xué)分析NRCF中相關(guān)蛋白質(zhì),確定了NRCF中相對分子質(zhì)量為(232~440)×103條帶的蛋白質(zhì)組分,為進一步研究其中的功能未知蛋白提供了線索,對明確其是否對周圍神經(jīng)再生具有促進作用。

引用本文: 李玉萍,姜浩,李青峰,王會勇,湯璐佳,鄭勝武,劉琴秀,昝濤,謝蕓,陳瑜,鄭丹寧. 周圍神經(jīng)再生條件液中蛋白條帶質(zhì)譜分析. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2007, 21(6): 596-599. doi: 復(fù)制