目的 了解神經(jīng)再生條件液（never regeneration conditioned fluid，NRCF）中蛋白質(zhì)成分組成及相對分子質(zhì)量為220×103的蛋白帶中是否存在一類新的尚未知的神經(jīng)活性因子。方法 新西蘭大白兔25只，體重1.8～2.5 kg，取坐骨神經(jīng)建立神經(jīng)再生室模型。術(shù)后1周采集NRCF，采用凝膠過濾法分離NRCF中蛋白質(zhì)，主要分離相對分子質(zhì)量為220×103的蛋白帶，應(yīng)用自然聚丙烯酰胺凝膠電泳(native-polyacrylamide gel electrophoresis，Native-PAGE)法檢測其相對分子質(zhì)量。并對取得的相對分子質(zhì)量為220×103（a峰）和(20～40)×103（c峰）的蛋白帶，分別應(yīng)用已知的神經(jīng)活性因子抗體：抗神經(jīng)生長因子（nerve growth factor， NGF）抗體、抗膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（glial cell-derived neurotrophic factor, GDNF）抗體、抗腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子（brain-derived neurotrophic factor， BDNF）抗體、抗神經(jīng)營養(yǎng)素3（neurotrophin 3，NT-3）抗體、抗NT-4抗體、抗睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子（ciliang neurotrophic factor,CNTF）抗體，采用Western blot免疫印跡法和ELISA檢測，觀察抗原抗體反應(yīng)。結(jié)果 經(jīng)凝膠過濾法分離的NRCF蛋白質(zhì)，多集中在相對分子質(zhì)量為(20～40)×103和220×103。相對分子質(zhì)量為(20～40)×103蛋白帶中神經(jīng)營養(yǎng)因子與抗NGF、抗BDNF、抗NT-3、抗CNTF等抗體反應(yīng)，相對分子質(zhì)量為220×103的蛋白帶所含神經(jīng)營養(yǎng)因子僅與抗NT-4抗體反應(yīng)。結(jié)論 NRCF中相對分子質(zhì)量為220×103的蛋白帶僅與抗NT-4抗體反應(yīng)，且生物活性遠(yuǎn)強(qiáng)于NT-4，該蛋白帶中可能存在一類新的神經(jīng)活性因子。
引用本文： 葉伊琳,鄭丹寧,李青峰. 神經(jīng)再生條件液中相對分子質(zhì)量為22萬的蛋白提取與鑒定. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2007, 21(6): 600-603. doi: 復(fù)制