• 1煙臺(tái)市煙臺(tái)山醫(yī)院創(chuàng)傷骨科(山東煙臺(tái),264000);;
  • 2四川大學(xué)華西醫(yī)院生物治療國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室·干細(xì)胞與組織工程研究室,3華西醫(yī)院病理科;

目的 了解WO-1在體外環(huán)境中對(duì)人成骨細(xì)胞增殖、分化的影響,為骨組織工程學(xué)研究提供更多的方法。方法 采用培養(yǎng)人胚成骨細(xì)胞,以生長(zhǎng)曲線和3 H-TdR法分析WO-1與成骨細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)的量效關(guān)系,在最佳作用濃度下,以接種細(xì)胞克隆形成率,流式細(xì)胞技術(shù)分析細(xì)胞周期,透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué),了解WO-1對(duì)細(xì)胞活性和細(xì)胞增殖的影響;以ALP活性檢測(cè),3 H-Proline摻入實(shí)驗(yàn),放射免疫法測(cè)骨鈣素合成及I型膠原和骨鈣素mRNA的表達(dá)等,從蛋白質(zhì)和mRNA兩個(gè)水平觀察WO1對(duì)細(xì)胞功能的影響。結(jié)果 WO-1在高濃度時(shí)對(duì)人胚成骨細(xì)胞增殖有抑制作用,低濃度時(shí)對(duì)人胚成骨細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用,最佳作用濃度8 μg/ml,在0.25~8 μg/ml濃度范圍內(nèi)存在量效關(guān)系。在8 μg/ml WO-1作用下,實(shí)驗(yàn)組人胚成骨細(xì)胞接種克隆形成率增加,克隆體積增大;群體倍增時(shí)間明顯縮短,電鏡下見(jiàn)細(xì)胞器較對(duì)照組發(fā)達(dá);而ALP活性、Ⅰ型膠原合成、骨鈣素合成等,在蛋白質(zhì)及mRNA兩個(gè)水平均有增加,且與對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 低濃度WO-1,可促進(jìn)體外培養(yǎng)的人胚成骨細(xì)胞活性及增殖,加強(qiáng)細(xì)胞合成Ⅰ型膠原、骨鈣素等基質(zhì)的功能,可用作成骨細(xì)胞增殖及分化的促進(jìn)劑。

引用本文: 陳旭,楊志明,解慧琪,李勝富. WO-1對(duì)成骨細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2005, 19(10): 822-825. doi: 復(fù)制